第八章 自动层析仪.ppt

* 现代仪器分析modern Instrumental Analysis 第八章 自动层析仪 AKTA-Frac900 一、 离子交换色谱 固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子交换树脂； 流动相：阴离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应；组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大，保留时间长； 第一节自动层析仪色谱柱的类型与原理 一、 离子交换色谱 阳离子交换：R—SO3H +M+ = R—SO3 M + H + 阴离子交换：R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH- 应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。 第一节自动层析仪色谱柱的类型与原理 二、 排阻色谱色谱 固定相：凝胶(具有一定大小孔隙分布)； 原理：按分子大小分离。小分子可以扩散到凝胶空隙，由其中通过，出峰最慢；中等分子只能通过 部分凝胶空隙,中速通过；而大分子被排斥在外，出峰最快；溶剂分子小，故在最后出峰。 二、 排阻色谱色谱 全部在死体积前出峰；可对相对分子质量在100-105范围内的化合物按质量分离。 三、亲和色谱 原理：利用生物大分子和固定相表面存在的某种特异性亲和力，进行选择性分离。 先在载体表面键合上一种具有一般反应性能的所谓间隔臂(环氧、联胺等)，再连接上配基(酶、抗原等)，这种固载化的配基将只能和具有亲和力特性吸附的生物大分子作用而被保留。改变淋洗液后洗脱。 pH/C 900 pH电导检测器 UV-900 紫外检测器 190-700nm任选三波长 P-900 系统泵 双泵，四泵头 储物盒和缓冲液托盘 第二节 自动层析仪的构成 侧面图 三通阀 系统泵 双泵，四泵头 梯度混合器 在位过滤器 上样阀 接柱位 拧开接头，接层析柱 紫外流动池 电导流动池 pH流动池 收集阀 部分收集器 * *