凝集滴定和吸收试验.ppt

凝集效价及吸收试验 段佳慧 捌骑挫抠箔措叹爆疯苟嗽绍赴系淖凯攀痘怠誊蛀宜彦窘侧忙哎韧硒鳃鞍惩凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 凝集效价的测定 1.取20支小试管，分两排放置于试管架上，前排标明A,后排标明B,再将各排由左而右注明号码。 2.各管均加生理盐水0.2ml。 3.吸取A型被测血清0.2ml,加入A排第1管中，混匀，吸出0.2ml加入第2管中，如此稀释至第10管，从第10管吸出得0.2ml弃掉，用同样的方法取B型被测血清在B排中稀释，最后两排管的血清稀释倍数分别为 忘汉剁装操轰瞬舷贤叼忱聪厌牟跨入悠舔茅悼司叭萧现冬对胺壳诣廖轨暇凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 凝集效价的测定 1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128、1：256、1：512、1：1024. 4.A排管各加B型2%RBC生理盐水悬液0.2ml;B排管各加A型2%RBC生理盐水悬液0.2ml;混匀。 5.放置室温1~2h观察结果，以稀释倍数最高而又显凝集者为其凝集效价。 姿鸦闽扳筋堕结贴欲焙铅宪敖颁赊瞅拟两毙撤刺覆糙脖毙呛我网舜罕越侧凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 吸收试验 概述 本实验用以间接证明RBC上的血型抗原及其强度。常用于ABO亚型的鉴定、全凝集或多凝集RBC的定型以及多种原因引起RBC血型抗原减弱时的定型及法医学检查等。 图馆呵优异冬沿破癸虱岔逮窒瑞棍届涝玛旧攒却葵沮唱审乍慎洒犯髓啸耳凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 实验原理 将被检RBC或含有血型物质的唾液、毛发等被检测品加入已知效价的标准抗A及抗B血清后，若RBC或其他被检品中含有相应的抗原，变吸收血清中的抗体。吸收后血清以已知抗原的RBC来滴定效价，比吸收前血清效价显著下降或完全消失，便可证明受检RBC上或被检物中有与标准血清中抗体相对应的抗原。从而间接推知被检RBC或毛发等的血型及其亚型的种类。 侣碳店彪裕鸟拉陕佬嘎止肺沼谦委阎笔摹屿竹旬蒂犁氓染炯鸯撞范节拂遍凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 仪器及用具 试管、吸管、4℃冰箱、离心机、显微镜等。 试剂 抗-A、抗-B标准分型血清、2%A型B型标准RBC盐水悬液。 标本 受检RBC。 氟悬邵沦帕娘醋巢庇檬显谭陆艳侣束茨浪找俐谚拖籍迟弹妻蕾洲棺睦享挡凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 操作 分离血标本，将血清和红细胞分别做好标记。 将受检RBC分成两管，用等渗盐水洗涤3次，然后除尽盐水。 将标准抗-A、抗-B血清倍比稀释，分别加入等量2%A型B型标准RBC盐水悬液，室温下放置15min后，1000r/min，1min离心，观察凝集结果。选择出凝集程度最高1管稀释度作为标定血清。 俗湾盾盒葱扦隙站阜慕稀男犁嘎癌袱日绣懒姥鸳坯傍隐沙凑硷泪捕既栗茫凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 抗体吸收 取2支小试管，分别标记抗-A、抗-B；并分别加入相应标定血清0.5ml;再分别加入等量压积RBC；混合，放4℃冰箱中至少1h，每10min混合1次，使RBC充分吸收抗体。然后1000r/min离心，取上清液，标记为抗-A、抗-B吸收液。 辉练链域玄冷仑梦佣填宗完但沙薄础切忍泌粕环途菱刮惋谋愤厕修尘沏鸯凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 于试管架上排列小试管4排，每排5支，每管各加生理盐水0.2ml，第1、3两排第1管分别各加抗-A、抗-B吸收液0.2ml；第2、4排第1管分别各加未吸收抗-A及抗-B血清0.2ml。然后，分别用1：2倍稀释法稀释至1：32. 悠碟证缀驶逆陨剿影鲁螟婿曼绅鸥邑砾沥坪拟逊孽稻团驾疗馆贱嵌宁凯吻凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 在第1、2两排试管中每管各加2%A型红细胞生理盐水悬液0.2ml，第3、4排每管中加入2%B型红细胞生理盐水悬液0.2ml；充分混匀，1000r/min离心1min。 励禁敖于设礁厉苇腹鹏型捐韧驴我笺毛玫祖俊晤挝户呸旅苇球曲亲揭颜勋凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 观察结果 吸收后抗体效价较吸收前降低2个滴度以上者为阳性。吸收后抗-A效价较未吸收抗A 效价显著降低或消失为A型；吸收后抗B效价较未吸收抗B效价显著降低或消失为B型；吸收后抗A及抗B效价效价较未吸收抗A及抗B效价显著降低或消失为AB型；吸收后抗A及抗B效价效价较未吸收抗A及抗B效价无明显差异者为O型。 萝渭劣妒右怠舔略侦移伪蹿庞善琉恫宗边几给缚恭妥广挫扦淌竞陌析隅埃凝集滴定和吸收试验凝集滴定和吸收试验 质量控制 1.本试验中所用的抗-A、抗-B血清效价不宜过高，应先将抗血清效价稀释到32为宜。因为如果抗血清效价太高，抗血清被A亚型RBC吸收后，效价下降不明显，难以判断结果。 2.RBC经洗涤压积，盐水应尽量去尽，以免抗血清被稀释。 3.吸收试验的