008 环境致癌物体外真核快速检测技术的研究及应用进展.pdfVIP

· 32 · 国外医学卫生学分册 2008年 第35卷 第1期 008 环境致癌物体外真核快速检测技术的研究及应用进展 余红平 综述 仇小强审校 (广西医科大学公共卫生学院，广西 南宁 530021) 摘要： 近年来，工农业生产向环境中排放的大量化学物质污染问题已引起各国政府的重视和全社会的关注。如何对不同形 态环境致癌物进行敏感、准确、快速的检测具有重要的现实意义。本文对目前国内外环境致癌物的体外真核快速检测技术的 研究及其应用进展进行了综述。 关键词：致癌物；体外真核快速检测技术 中图分类号：994．6 文献标识码： A 文章编号： 1001．1226(2008)01．0032．04 随着工农业生产的发展，大量化学物质进入环 SCGE)又称彗星试验(comet assay)，是近年来发展起 境中，在环境中相互作用，对人群健康产生深远的影 来的在单细胞水平检测DNA损伤的新技术。该技 响。近年来我国肿瘤、先天畸形等疾病发生率和死 术广泛应用于利用各种有核细胞检测受试物对 亡率持续升高，与环境污染特别是环境中的化学致 DNA的损伤和修复效应以及环境生物监测、药物筛 癌物污染有密切关系。据估计，人类的肿瘤有80％ 选、肿瘤发病机制及诊断与治疗研究、衰老和细胞凋 ～ 90％由环境因素引起，其中80％以上为化学因 亡机制的研究。SCGE的原理是：在细胞裂解液作用 素。对环境化学物质可能的致癌效应多用Ames试 下，细胞膜、核膜及其它膜结构受到破环，细胞内的 验检测。系统的化学物质致癌毒性检测往往是在 蛋白质、RNA等均可进入凝胶而扩散到裂解液中， Ames筛选的基础上，再经过2年的慢性动物毒性试 而细胞核中的DNA由于分子量很高无法进入凝胶， 验，然后进行人群流行病学调查，才能最终确定该化 只能停留在原位。在碱处理DNA解螺旋后，DNA链 合物是否为人类确定的致癌物。但由于动物实验费 断裂受损后出现的DNA片段由于分子量很小而通 时费力，大量化学物质未能完成2年的慢性毒性试 过凝胶分子筛，并在电泳电场作用下向阳极迁移，染 验，仅进行了Ames试验和急性动物实验后即进入环 色后在显微镜下可形成彗星状图像。细胞核DNA 境中。因此，开发快速简单的新型体外筛查技术，与 受损伤越严重，产生的断链或碱变性碎片就越多，片 常规的Ames试验进行互补，提高体外筛查的准确性 段也越小，电泳表现为彗星尾越长、彗尾越亮。通过 和可靠性，是目前一个重要的研究方向。与Ames试 荧光显微镜观察有无彗星及彗尾的长度、亮度、出尾 验采用的原核生物相比，真核生物具有基因组结构 率等，判断细胞DNA有无受损伤及损伤程度。 更接近人类、可检测更多种的基因突变类型、部分细 近年来人们应用SCGE技术在筛选环境致癌物 胞如人或啮齿类肝细胞还可检测前致癌物等优点， 方面进行了大量的工作。Meng等 应用SCGE技术 所以利用真核体外筛选系统的研究越来越普遍。目 研究空气中重要污染物SO，对小鼠DNA的损伤效 前单细胞凝胶电泳、基于DNA损伤修复基因的检测 应，结果显示SO，可对小鼠的脑、肺、肝脏、肾脏等多 体系、DNA加合物、基因芯片等体外真核快速检测 个器官组织细胞DNA造成损伤。在辐射致DNA损 新技术被研究开发并已应用于检测环境致癌物质。 伤的研究方面，Vijayalaxmi等 发现SCGE能检出仅 0．05Gy 7射线引起的人血淋巴细胞 DNA损伤。 1 单细胞凝胶电泳