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·1128 · 实用医技杂志 2 7年 3月第 14 卷第 9期 (旬刊 ) J PM T, M arch. 2 7, V ol. 14,N o. 9 ( Issued Every Ten D ays)
用的方法 ,同时测定两种免疫球蛋白能提高这一方法的敏感 染色法 。改 良 W a rth in - Sta rry 银 染色 是经典 的 Hp 染色方
性 。在进行 EL ISA 试验时 , 最重要 的是抗原选择 , 该试验的 法 [2 ] , Hp 在黄 色背景下呈现出黑色螺旋状形态 ,该染色方法
敏感性虽高 ,但缺乏特 异性 ,从而影响对试验结果的判断 。要 技 术要 求高 ,操作繁琐 , 每次染色需加温 、恒温及配显影液 ,热
提高 EL ISA 试验的特异性和敏感 性 , 则需要对抗原进一步纯 水冲洗 等 ,若操作不当容 易造成在切片上留下银颗粒沉淀与
化 ,抗原则可获得较高 的特 异性和敏感性 。血清学方法简便 , Hp 横截面 形态相 混淆的现 象 ;改 良 Giem sa染色 是一步双色
成本较低 ,患者对采血进行检 测的方法比做 胃镜检 查更乐意 快速染色法 ,操作更为简便 , 染色效果好 , 现已广泛应用 于常
接受 。由于抗 Hp 抗体可长时间维持在阳性水平 ,至少需要 6 规检测和科研中 [3 ] ,在显微镜下 Hp 染成淡蓝色 ,菌体 形态清
个月 ~12 个月才能降到足以预测治疗成功的程度 , 血清学方 楚 ,切片背景清晰 , 不但 可观察 到 Hp 数量 、侵入 深度和 分布
法便失去了原有的吸引力 ,但 在流行病学调 查中仍有它的应 情 况 ,还能观察到 胃黏膜病理改变情况等 ; 碱性品红 、石碳酸
用空间 。 复红 、亚 甲蓝 、中性红 、甲苯胺蓝 、甲基 紫 、甲苯酚紫染色 都是
5 多聚酶链反应 单 染法 ,操作简便 , 染色时间短 ,菌体形态 和切片背景呈 一色
多聚酶链反应 ( Polym erase ch ain reaction , PCR ) 实际上是 性 ,当细菌量少时应与黏液成分认真区分 ; 吖啶橙 荧光染色 ,
一种核酸片段体外扩增试验 。做试验的先决条件是首先必须 Hp 呈淡橙红色荧光 , 可以更好地辨 别 Hp 的形态特征 , 尤其
清楚某一基因的核苷酸序 列 , 然后人 工合成其中两个特异性 在 Hp 量少时优于 W arth in - Starry和 G iem sa染色 , 吖啶橙荧
片段作为引物 ,在 PCR仪 上经过 3 个 ~5 个循环扩 增其核 光 染色 简便 、快速 ,但需要荧光显微 镜进行观察 ;荧光抗体免
酸片段 ,使其成倍增长 ,然 后取其 片段作琼脂糖凝胶 电泳 , 电 疫 组织化学方法也有人使用 ,不 比组织化学染色方法有更多
泳后取出凝胶在紫外线灯 下观察 结果 , 即可判断所 得产物是 的优点 。
否为基因产物 。目前亦可用这一反应来检 测标本中有 无 Hp 6. 2 Hp 形态分布情况 通过组 织化学染色 显微镜 下观 察 ,
的存在 ,甚至还可进一步用核苷酸序 列分析 或特异性探针加 Hp 呈单个散在或成团聚集 ,形态以螺旋状 、弯曲杆状 、球状菌
以鉴定 。可是 PCR高敏感性也有它致命的弱点 ,使 用试剂浓 最 常见 , Hp 在生存环境不利时易发生形态变 异 ,球形变常见 ,
度 、操作温度 、过度扩增 、极少 DNA 污 染等都可导致假 阳性 。 短杆状 、长丝体 、巨球体等形态亦可见 到 。根据 Hp 数量和分
严格控制 ,合理选择 DNA 扩增循环次数 ,防止污染 ,设置对照 布 密度进行半定量测定 ,将 Hp 感染分为 4 级 : ( - ) :无特征
等都是不可忽视的因素 。采用 PCR 技术在 Hp 诊断和评价治
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