工业发酵分析讲稿课件.ppt

工业发酵分析讲稿;1．绪论;绪论;1.2工业发酵分析的目的任务;1.3工业发酵分析的内容;工业发酵用原材料的分析;发酵工艺的生物化学分析或生化过程的参数检测;目的产物、中间品、成品的质量检测;目的产物综合利用分析;1.4工业发酵分析的分析方法;化学分析法;仪器分析法;色谱法;1.5　工业发酵分析所涉及的学科;1.6工业发酵分析的作用;第二章　工业发酵分析样品的采集、制备、保存与处理;2.采样的一般程序;;3．采样的一般方法;采样的一般方法;1）固体样品的采集;2）液体、半固体样品的采集;3）气体样品采集 ;2.2　样品的制备;1．固体试样 ;缩分;4）过筛;5）混匀;2．液体、浆液或悬浮液体样品;2.3　样品的保存;1.　固体样品;2.　液体试样;2.4　样品的处理（前处理）;1.　有机物破坏法;1）干法（灰化）;2）湿法;2.　蒸馏法;3.　溶剂提取法（萃取法）;1）溶剂分层法;2）浸提法;3）双水相萃取法;4.　盐析法;5. 磺化法和皂化法;6. 沉淀分离法;7. 掩蔽法;8. 色谱分离法;9.浓缩;思考题;第三章 化学分析法 ;1. 重量分析法;1)挥发法;2)萃取法;3)沉淀法;2. 滴定分析法;1)分类;2)滴定方式;D 间接滴定法;3)滴定终点指示的方法;3.2　水分的测定;1.加热干燥法;1）常压烘箱干燥法;2）减压加热干燥法;3）红外线干燥法;加热干燥法;2.蒸馏法;;3.卡尔费休法（KF法）;滴定终点的确定有两种方法：;卡尔费休法（KF法）;3.3　酸度的测定;1.总酸度的测定――标准碱滴定法;3）结果计算;2.　挥发性酸的测定――水蒸汽蒸馏，标准碱液滴定;3.有效酸度（PH）的测定――直接电位法;3.4　脂类总量的测定;2.索氏提抽法;2）说明与注意事项;3.酸性醚提取法（盐酸－乙醚提取法）;2）适用范围;4.氯仿－甲醇提取法;2）适用范围;3.5　蛋白质和氨基酸的测定;2.　蛋白质测定的常用分析方法;常用方法有：;3.　粗蛋白的测定――凯氏定氮法;;思考题：;4.　发酵液中氨基氮的含量测定;2）测定原理　;3）测定方法（滴定终点指示法）;①双指示剂滴定法;②电位滴定法;4）说明与注意事项;3.6　糖类的测定;;;2.　原料/发酵液中还原糖的测定;2）供试液中糖的测定方法I：铜还原――直接滴定法;测定步骤分：;①斐林试剂的校正：;②定糖： ;斐林试剂测定还原糖操作规程：;方法II　铜还原――KMnO4滴定法;方法III　铁氰化钾还原――碘量法;3.原料/发酵液中水溶性糖的测定 ;4.原料中粗淀粉的测定;思考题;补充　液相色谱基础知识;一、色谱起源;二、定义 色谱法：利用组分在两相间分配系数不同 而进行分离的技术 移动相：携带样品流过整个系统的流体 固定相：静止不动的一相，色谱柱固定液; 液相色谱基础知识;液相色谱基础知识;溶 剂 等 级;水 / MeOH梯度 ODS 柱;溶 剂 等 级;;缓冲液的使用;过滤：0.45um或更小孔径滤膜 目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液。 脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动 无在线脱气应注意： 1）每天脱气 2）如使用氦脱气，对混合溶剂脱气时间不能过长;岛津VP系列输液泵;LC-10ATvp泵： 串联式往复泵;单向阀结构;液相色谱基础知识;梯度洗脱形式的选择;液相色谱基础知识;1. 使用流动相溶解样品 -- 减少溶剂峰，尤其是组分峰靠近溶剂峰时由为重要 -- 保证样品在流动相中的溶解度，避免样品在系统中尤其在柱中产生沉淀 2. 进样前最好使用0.45um 的膜进行过滤 如果样品很脏，要使用0.2um的膜进行过滤;进样器;进样量和检测器响应的关系示意图;手动进样器的原理图;交叉污染的原因;手动进样法;手动进样法;柱温箱;柱压低于150kgf/cm2 柱温在40℃左右，最高使用温度为50℃ 缓冲液PH使用范围为2～7; 液相色谱基础知识;分 析 柱 的 维 护;症状：系统高压、峰型变差（拖尾峰、前沿峰、分叉峰），保留时间的改变 延长柱寿命方法： 修补柱头 换过滤片 倒冲柱;常用检测器;原理：基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性