所以示差折光检测器对除流动相外的所有物质都有响应.PPT

示差折光检测器（RID) 王竹青 2012-12-15 安捷伦LC1260检测器 可变波长检测器（VWD） 二极管阵列检测器（DAD） 示差折光检测器（RID） 荧光检测器（FLD） 蒸发光散射检测器（ELSD） 示差折光检测器的原理 工作原理：利用光在不同介质中的折光系数不同，给出响应信号。 （是通过连续测定色谱柱流出液折光指数的变化而对样品浓度进行检测的。） 折光指数是光在真空中的速度和光在某种介质中的速度之比，是一个无量纲的常数。 折光指数的大小表明了该介质光学密度的高低。 每种物质都有各自的折光指数，所以示差折光检测器对除流动相外的所有物质都有响应，因此成为一种通用性很好的检测器。 示差折光检测器属于中等灵敏度浓度型检测器，其响应值取决于柱后流出液折射率的变化，采用含有样品的流出液与不含样品的流出液的同一物理量的示差测量。由于每种物质都有各自的折射率，因此示差折光检测器对所有物质都有响应，是一种通用型检测器，具有广泛的适用范围。受温度影响比较大，不能用于梯度洗脱。 检测器参比池一般1ml/min流速20min差不多搞定，可以先平衡样品池，然后再平衡参比池，此方法平衡较快。 安捷伦示差折光检测器的光路 Agilent示差折光检测器是根据样品池（6）中的液体样品和参比池（11）中的流动相之间的折光指数的差值而给出响应。 光源钨灯（1）发出的光通过聚光镜（2）聚焦并通过准直透镜（5）然后照在流通池上。 流通池按对角线分为两半，由参比池（11）和样品池（6）组成。 光先通过参比池（11）再通过样品池（6），然后经平面镜（7）反射之后又依次通过样品池（6）及参比池（11）并通过零点调节镜（8）使得光到达接受器的两个二极管（3）。 当参比池和样品池中均为流动相时，折光指数相同，落在两个二极管的光强是一样的；当色谱柱流出物进入样品池时，折光指数改变，从而使落在每个二极管的光强不同，因而产出光电流，把此电流放大之后经过校准变为检测器的信号，用纳折光指数（nRIU）来表示。这一信号相当于样品流通池的样品池和参比池中的流动相折光指数之差。 1.正确放置溶剂瓶和废液瓶 2.循环使用流动相 3. 示差折光检测器不能用做梯度洗脱 4.保证检测器的温度恒定 5.不可让流通池承受过大的压力（反压很小，约为5bar） 6. 注意某些溶剂随长时间存放而改变会造成基线的漂移 7. 避免流动相和特定的色谱柱反应 示差折光检测器的使用注意事项 1.流路入口 2.加热器 3.热交换器 4.样品池 5.冲洗阀(Purge Valve) 6.循环阀(Recycle Valve) 7.废液桶 8.参考池 9.溶剂瓶 示差折光检测器RID示意图 1.正确放置溶剂瓶和废液瓶 要把溶剂瓶和废液瓶放在比示差折光检测器和溶剂泵还要高的位置，这样可以使得使样品池有一定压力，有助于优化检测器的性能。 2.循环使用流动相 建议循环使用流动相。在没有进行分析时，打开循环阀，让流动相进行循环，这样泵就可连续运行不必停止，一直到进行下一个分析。这样操作不仅可以节省流动相，而且检测器可以连续稳定地运行，随时进行样品分析。 3.RID不能用做梯度洗脱 由于介质的改变和压力的波动都会影响基线的稳定性，所以使用示差折光检测器时不能进行梯度洗脱。 4.保证检测器的温度恒定 光学系统和流动相的温度对基线的稳定性影响很大。示差折光检测器可在比室温高5℃到55℃的范围内控温。建议将温度设为比室温高5℃，并确保柱温箱的温度与检测器保持一致。温度不宜过高，因为介质的折光指数随温度升高而降低，温度过高会使灵敏度降低。 5.不可让流通池承受过大的压力 示差折光检测器流通池的反压约为5bar，如果还要在系统里连接其他检测器或馏分收集器，必须将它们连接在示差折光检测器之前。即示差折光检测器在流路系统里必须放在最后，以防压力增大时损坏RID的流通池。 6.某些溶剂随长时间存放而改变会造成基线的漂移 例如乙腈/水的混合物中乙腈的量会降低，四氢呋喃会变成过氧化物，在吸湿性有机溶剂中的水量会增加，而保存在参比流通池中的溶剂如四氢呋喃会产生气体。 7.避免流动相和特定的色谱柱反应 某些流动相和特定的色谱柱反应，会产生长时间的噪声，例如乙腈/水流动相和氨丙基键合固定相在一起会出现这一现象。要判断长时间的噪声是否是由流动相/色谱柱的反应而产生，应该使用限流毛细管（G1362-87301）代替色谱柱，考查示差折光检测器的性能。