二、菌种制作.ppt

　食用菌菌种生产技术 学习重点：食用菌制种条件，培养基种类及配方，菌种分离方法，无菌接种技术，菌种培养、保藏等方法措施。 学习目的：使学生掌握食用菌母种、原种、栽培种的制种技术。 第一节　食用菌菌种的概念 一、菌种的概念　原意是指孢子（相当于植物的种子） ，但在实际生产中，常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。 二、菌种的类型　在生产中根据菌种的来源、繁殖代数及生产目的，把菌种分为母种、原种和栽培种。分别叫一级种、二级种、三级种。 母种：将纯菌丝体或孢子在试管培养基中繁殖而成。可以繁殖原种，也适宜菌种保藏。 原种：母种菌丝在固体培养基上繁殖而成。这一过程增强菌丝对培养环境的适应性，又起到扩繁的作用。原种可以直接出菇。 栽培种：由原种扩繁而成。主要是为了扩繁，为生产提供足够的菌种。 第二节　食用菌制种条件 一、食用菌制种程序 种菇 试管培养基 培养 母种 固体培养基 原种 固体培养基 栽培种 培养 培养料灭菌 培养基灭菌 培养料灭菌 培养 二、制种的基本设备和条件 1.接种条件：无菌条件 　　　 　　　接种室 　　 接种箱 超净工作台 酒精灯和接种工具 2.培养条件 　菌种培养室：温度25度左右　 恒温培养箱 3.消毒灭菌条件 灭菌条件 高压灭菌锅 手提式 大型高压灭菌锅 常压灭菌锅 常压灭菌锅 3.消毒条件 常用的消毒药剂有： 酒精、甲醛、硫磺、多菌灵、克霉灵、气雾消毒剂、生石灰、高锰酸钾等。 紫外线灯30W 4.制种常用容器 玻璃容器： 试管、培养皿、三角瓶、罐头瓶、菌种瓶等。 塑料容器： 聚乙烯、聚丙烯塑料袋或筒料，塑料套环，聚丙烯膜等。 5.菌种保藏条件 冰箱 冷藏室 冷库 第三节　食用菌菌种的培养基 一、培养基 1.概念：培养基是采用人工的方法，按照一定比例配制各种营养物质，以供给食用菌生长繁殖的基质。 2.种类：液体培养基　固体培养基　固化培养基 液体培养基优点是营养分布均匀，有利于菌丝吸收，理化条件易控制，便于机械化操作；菌丝生长迅速，产量高。 固体培养基优点是原材料广泛价格低廉，配制容易。 固化培养基是指将各种营养物质按比例配成营养液后，再加入适量的凝固剂，冷却后凝固。 二、母种培养基 1.常用母种培养基配方 马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml。 马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，维生B110mg，水1000ml。 2.试管培养基制作 称重　马铃薯去皮切成小块　加水煮沸30分钟左右　过滤取汁　加糖、琼脂及其它营养　趁热分装试管　塞好棉塞　每7个捆成一梱　棉塞部位用牛皮纸包好　灭菌　摆鈄面。 装入试管的量为试管的1/5—1/4高度。 三、原种和栽培种培养基 1.培养基配方 1）阔叶树锯末78%，米糠或麸皮20%，石膏粉1%，蔗糖1%，加水至含水量50%－60%。 2）谷粒（玉米、麦粒等）1000克，石膏粉13克，碳酸钙4克。 2.培养基制作 拌料　灭菌　谷粒煮熟而又不胀破，拌入石膏粉，装瓶灭菌。 第四节　食用菌菌种分离 菌种分离是菌种纯化的基本方法，是制种的重要环节。 　　　　　 组织分离 菌种分离　孢子分离 　　　　　 种木分离 一、接种箱和超净工作台的使用 1.接种箱　擦净　放入物品（培养基、接种工具等其它物品　熏蒸30分钟或紫外灯照射30分钟　点燃酒精灯　接种 2.超净工作台　擦净　放入物品　紫外灯照射30分钟　关掉紫外灯　打开过滤风机　点燃酒精灯　接种. 无菌操作及转管 1.无菌操作　即在绝对无菌的条件下接种。 2.转管 　将母种接到试管培养基上，目的扩大数量，也叫扩繁。 无菌室 　　　　　　超净工作台 酒精灯 三、菌种的分离 1.组织分离法 选择头潮菇，菌肉肥厚，形正，未散孢，八分成熟的种菇。 消毒　接种　培养　纯化　试验 孢子分离法 是用成熟的有性孢子萌发培养成菌丝体而得到的菌种。 消毒　采集孢子　接种　培养　挑菌落　纯化 第五节　食用菌菌种制作 　　 一、培养基的选择与制备 1.培养基的选择 根据菌类所需要的营养，菌种的保存时间，栽培季节，栽培料资源来确定培养基配方。 2.培养基制备 　注意：含水量适宜，装瓶的松紧度适宜，培养基做好后或拌料装瓶后应马上灭菌。 二、接种 一支试管可以扩繁 为20－30支试管 一支试管可以 扩繁为五瓶原种 一瓶原种可以接 30－40瓶栽培种 第六节　菌种的培养 1.营养成分 2.水分和空气 3.温度 4.光线 5.酸碱度 6.培养时间 7.定期检查 第七节　菌种质量的鉴定 　菌种质量的鉴定一般是从菌种的纯度、长势、颜色、菌龄、均匀度和出菇快慢等6方面进行鉴定的，最可靠的方法就是出菇试验。 一、母种质量鉴定 1.转管次数　最多不超过4－5次　　　 2.菌龄　低温保存