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仪器分析复习题1-28
什么是色谱法?色谱法的原理?色谱分离的本质?
答:①色谱法又称色谱分析、色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。
②色谱法的原理:利用样品混合物中各组分理、化性质的差异,各组分程度不同的分配到互不相溶的两相中。当两相相对运动时,各组分在两相中反复多次重新分配,结果使混合物得到分离。
③色谱过程的本质:分配系数的差异是所有色谱分离的实质性的原因。分配系数是在一定温度下, 溶质在互不混溶的两相间浓度之比。色谱的分配系数是被分离组分在固定相和流动相之间浓度之比, 以K表示如下式:
式中:Cs----每1mL固定相中溶解溶质的质量; Cm----每1mL流动相中含有溶质的质量。
色谱法按分离过程的物理化学原理分类可分为哪些色谱?
答:①吸附色谱法:吸附色谱利用固定相吸附中西对物质分子吸附能力的差异实现对混合物的分离,吸附色谱的色谱过程是流动相分子与物质分子竞争固定相吸附中心的过程。
②分配色谱法:分配色谱利用固定相与流动相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离。分配色谱的固定相一般为液相的溶剂,依靠图布、键合、吸附等手段分布于色谱柱或者担体表面。分配色谱过程本质上是组分分子在固定想和流动相之间不断达到溶解平衡的过程。
③离子交换色谱:利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力诧异来实现分离。离子交换色谱的固定相一般为离子交换树脂,树脂分子结构中存在许多可以电离的活性中心,待分离组分中的离子会与这些活性中心发生离子交换,形成离子交换平衡,从而在流动相与固定相之间形成分配。固定相的固有离子与待分离组分中的离子之间相互争夺固定相中的离子交换中心,并随着流动相的运动而运动,最终实现分离。
④凝胶色谱(空间排斥色谱、排代色谱、排阻色谱):凝胶色谱的原理比较特殊,类似于分子筛。待分离组分在进入凝胶色谱后,会依据分子量的不同,进入或者不进入固定相凝胶的孔隙中,不能进入凝胶孔隙的分子会很快随流动相洗脱,而能够进入凝胶孔隙的分子则需要更长时间的冲洗才能够流出固定相,从而实现了根据分子量差异对各组分的分离。调整固定相使用的凝胶的交联度可以调整凝胶孔隙的大小;改变流动相的溶剂组成会改变固定相凝胶的溶涨状态,进而改变孔隙的大小,获得不同的分离效果。
什么是正向色谱?什么是反向色谱?为什么在HPLC中常用反相色谱?
答:①正向色谱(NPC):固定相的极性大于流动相的极性,分离水溶性和极性较大的化合物 。反相色谱(RPC):流动相的极性大于固定相的极性。
②反相液相色谱由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,分离脂溶性化合物。RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式,几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。?反相色谱法适于分离非极性,极性或离子型化合物,大部分的分析任务皆由反相色谱法完成。
不同色谱分离起主导作用的是?
答:
液相色谱中的等比洗脱操作与梯度洗脱有什么不同?
答:等度洗脱是指在分离过程中,流动相的组分构成一直不变包括比例以及浓度等;梯度洗脱多针对比较复杂的样品,因为等度洗脱的分离效果不加,通过调节流动相的组分构成来达到样品分离的目的。
5.气象色谱中的等温操作与程序升温操作的区别?(没搜到等温操作)
答:程序升温,是指色谱柱的温度按设置的程序连续地随时间线性或非线性逐渐升高,以使低沸点组分和高沸点组分在色谱柱中都有适宜的保留、色谱峰分布均匀且峰形对称。程序升温具有改进分离、使峰变窄、检测限下降及节约省时间等优点。 相比恒温来说,程序升温能够使后面出峰的高沸点物质加快出峰,减小扩散,而对于前面组分也会有更大的保留,利于分离。
6.什么是Van Deemter方程?有一毛细管色谱柱长5m,B=0.0012,C=0.002,μ=3cm/秒,计算该柱的理论塔板高度H和理论塔板数。
答:速率理论 H=A+B/ū+Cū 0.0064cm 78125块
7.气相色谱仪与液相色谱仪由哪几个主要部件组成?它们之间有什么异同点?
答: 气相:载气、净化器、流量计、色谱柱、检测器、记录器;
液相:流动相贮罐、泵、进样系统、色谱柱、检测器。
气相色谱 高效液相色谱 1.只能分析挥发性的物质,只能分析20%的化合物 几乎可以分析各种物质 2.不能用于热不稳定物质的分析 可用于热不稳定物质的分析 3.用毛细管柱色谱可得到很高的柱效 色谱柱不能很长柱效不会很高 4.有很灵敏的ECD和较灵敏的FID和TCD 没有很高灵敏度的检测器 5.流动相无毒,易于处理 流
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