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HSV_1作用于KSHVORF5_省略_动子区中特异性应答位点序列的初寻_程伟
第 卷第 期 南京医科大学学报（ 自然科学版）
31 5
年 月 （ ）
2011 5 ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING Natural Science · ·
595
HSV-1 作用于KSHV ORF50 启动子区中特异性应答位点序列的初寻
1 1 1 * 1
程 伟，郝婷婷 ，王子盾，朱小飞 ，冯宁翰，华立新，秦 娣 ，卢 春
1
（南京医科大学第一附属医院泌尿外科，江苏 南京 210029 ； 南京医科大学微生物学与免疫学系，江苏 南京 210029 ）
［摘 要］ 目的：构建卡波济肉瘤相关疱疹病毒（ ’ ， ） 启动子系列截短序列克
Kaposi s sarcoma-associated herpesvirus KSHV ORF50
隆， 初步寻找 作用于 启动子区中特异性应答位点序列。 方法： 以 基因组为模板， 扩增
HSV-1 KSHV ORF50 KSHV PCR KSHV
ORF50 启动子系列截短序列，克隆至含有虫荧光素酶（Luciferase ）报告基因的基本载体pGL-3 中，构建含ORF50 启动子系列截短
序列的重组 报告质粒。 系列重组报告质粒经酶切鉴定和序列测定分析后，分别转染单纯疱疹病毒 型（ ）感染后
Luciferase 1 HSV-1
的非洲绿猴肾细胞（Vero 细胞），进行 Luciferase 活性检测，计算并比较相对Luciferase 活性单位（Relative luciferase activity unit ，
）。 结果：成功分离、克隆 启动子系列截短序列； 感染随后转染重组质粒 、 和 与转染
RLU KSHV ORF50 HSV-1 p50-95 p50-46 p50-17
、 、 及 相比， 细胞中 活性显著下降。 结论：成功构建了含 启动子系列
p50-1500 p50-750 p50-375 p50-185 Vero Luciferase KSHV ORF50
截短序列的重组 报告质粒；
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