microRNA的液体芯片检测方法.pdf

200 分子诊断与治疗杂志　2011 年 5 月 第 3 卷 第 3 期　J Mol Diagn Ther, May 2011, Vol. 3 No. 3 · · •综 述• microRNA 的液体芯片检测方法 1 2 同颖娜 　李丹 [ 摘　要 ]　microRNA 表达谱的检测需要精确 、高通量和多重检测方法，液体芯片可通过编码微球结 合探针的序列差异，来检测相应的 microRNA 序列。 本文介绍了两代液体芯片背景的 FlexmiR 产品，其通 过锁核酸，逐步降温和单链酶解来提升对 microRNA 检测的特异性，为临床科研 microRNA 的研究提供新 的检测工具。 [ 关键词 ]　microRNA ；液体芯片；锁核酸 Beads based mircoRNAs liquid chip screening methods 1 2 TONG Yingna , LI Dan (1.Xian East Hospital, Shanxi, Xian 710043, China; 2.Luminex Shanghai Office, Shanghai 201203, China) [ABSTRACT]　microRNAs screening and profiling methods should be accurate, high throughput and multiplex. Beads based liquid chip methods could combine the colored coded microspheres and specific probes to distinguish the subtle change between microRNAs sequence. This review introduce the two generations of microRNAs products, FlexmiR, which are based on locked nucleic acid and step down hybridization to improve the specificity. All those would create the new test platform for microRNAs research and clinical application. [KEY WORDS]　MicroRNAs; Liquid Chip; Locked nucleic acid 了较高的要求。 另外 miRNA 在多个组织中差异表 1　miRNA 的研究背景 达，多重定性定量检测不同 miRNA 表达图谱也为越 1.1　microRNA 的发现 来越多的研究人员所关注 。 随着业界通用的曼彻斯 microRNA （miRNA ）的组成是一类在生物体内 特大学的 miRBase 数据库 [1] 不断增加，也对 miRNA 源长度约为 20~23 nt 的非编码型小 RNA ，由长度为 高通量多重检测的方法提出了更高的要求。 60~70 nt 的具有发夹结构的miRNA 前体（pre-miRNA ） 1.3　miRNA 的分析存在的难题 剪切而来。 成熟的 miRNA 通过与靶 mRNA 的互补 首先，miRNA 序列短使得很难像常规 DNA 序列 配对而在转录后水平上对基因的表达进行负调控， 片段检测其特异性。 其次，许多 miRNA 仅仅有一个 导 致 mRNA 的 降 解 或 翻 译 抑 制。 自 1993 年 发 现 碱基变异，对精确的错配识别提