D-氨基增殖及IL-2产生的作用.doc

D-氨基葡萄糖盐酸盐对小鼠淋巴细胞增殖及IL-2产生的作用 曹秀明，杨贵群，马娇 （哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心药物所、 抗肿瘤天然药物教育部工程研究中心 黑龙江 哈尔滨 150076） 摘要:目的 研究D-氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)对小鼠淋巴细胞增殖及IL-2产生的作用。方法 MTT法检测淋巴细胞增殖, 碘化丙锭（PI）检测淋巴细胞周期,ELISA法测定细胞内IL-2的含量。结果 在200μg/ ml—50μg/ ml浓度范围内,GAH均能促进小鼠淋巴细胞增殖。同时GAH还可以诱导淋巴细胞分泌IL-2。结论 GAH能有效促进淋巴细胞增殖,促进分泌IL-2,具有免疫作用。 关键词: D-氨基葡萄糖盐酸盐；淋巴细胞增殖；IL-2 中图分类号: 　　文献标识码: 　　文章编号: Effect of D-glucosamine hydrochloride on mice lymphocytes proliferation and IL-2 production CAO Xiu-ming, MA Jiao, WAN Xiao-feng (Institute of Meteria Medica,Research Center on Life Sciences and Environmetal Sciences,Harbin University of Commerce， Engineering Research Center of Natural Anticancer Drugs, Ministry of Education, Harbin HEILONGJIANG 150076,China)xiuming_2124294@163.com。 Abstract:Purpose To study the effect of D-glucosamine hydrochloride(GAH) on lymphocytes proliferation and IL-2 production of mice. Methods MTT assay was used to detect the proliferation of lymphocyte. ELISA was utend to determine the content of IL-2. Results GAH can promote lymphocytes proliferation of mice in the concentration limit of 200μg/ ml-50μg/ ml. At equal pace,GAH can also induce lymphocytes excrete IL-2.Conclusion GAH can increase lymphocyte proliferation significantly,and also encourage product IL-2.So GAH possesses immunification. Keywords: D-glucosamine hydrochloride; lymphocyte proliferation;IL-2 　D-氨基葡萄糖盐酸盐（D-glucosamine hydrochloride，GAH）学名2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖盐酸盐，其结构为D-葡萄糖分子中C2-羟基被氨基所取代,因氨基显碱性,与盐酸成盐。甲壳素经盐酸水解后可形成GAH , GAH具有参与肝肾解毒、抗炎、护肝、抗菌以及治疗风湿性关节炎症和胃溃疡等疾病的作用[1-7]。淋巴细胞增殖和IL2免疫学方面的小牛血清RPMI－1640培养液Gibco公司产品）；Fura－3/AM 、ConA（美国Sigma公司）；GAH由本实验室制备，纯度为98％以上二氧化碳培养箱为LNA-Ⅲ型(日本)超净工作台(苏州净化设备厂)BACKMAN，GS-6R）酶标仪(BIO-RAD 680)[8-10] 调整细胞浓度为1-5×10个／L，加入96孔圆底细胞培养板。ConA对照组：100μL细胞悬液与100μL含血清RPMI1640培养液（含ConA终浓度为10g/mL）的混合液；空白组：100μL细胞悬液与100μL含血清RPMI1640培养液的混合液实验组：100μL细胞悬液与100μL含（终浓度分别为200g/mL，100g/mL，50g/mL）的含血清RPMI1640培养液的混合液，每组设6个复孔。置于37℃、5%CO2的饱和水蒸汽培养箱中培养72h。轻轻吸取每孔上清液中的100μL每孔加100μL新鲜配制的含0.5mg/mLMTT的无血清培养基，继续培养4h，轻轻吸取培养液上清100μL，每孔加100μLDMSO溶解MTT甲