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TLC的定量分析
TLC的定量分析薄层色谱扫描仪的工作原理有两类:狭缝扫描光密度检测和CCD数码成像分析。?
狭缝扫描(可变波长扫描)是经典的方法,但是越来越多新发表的文章采用了数码成像分析。近年来也有大量对狭缝扫描和成像分析进行对比研究的文章。在食品检测领域,也有人按ICH规范对成像分析进行了系统的验证工作,包括:特异性、稳定性、线性、精度、准确度和适用性等。
来源:Joseph Sherma? Journal of Chromatography A, 880 (2000) 129–147
狭缝扫描光密度检测的优势在于可选择特定波长,因此可以找到检测物质的最大吸收峰,因此可提高检测的精度。而基于成像分析第二代薄层色谱扫描仪的优势在于仪器投资成本低,操作方便,更易于被分析人员接受。
对于最大吸收峰和特定波长扫描,其意义并不突出,就象HPLC中,采用通常的280nm检测,就能完成绝大部分定量分析,而很少有人为提高检测精度去寻找检测组分的最大吸收峰。另一方面,杂质和主成份一般都不在同一波长下有最大吸收,因此再怎样改变检测波长还是存在定量误差,但这并没有影响到实际应用。在薄层色谱中,最常用的淬灭荧光检测为254nm,而荧光发射检测为365nm,这两种检测可完成绝大部分的检测,这也是各国药典或者标准中采用这两个波长检测的原因。
详细分析参考:狭缝光密度检测和数码成像分析的技术比较
博黛科技评注? 2006.7
中药指纹图谱技术TLC具有快速、经济、可靠、操作简单、适用范围广、重现 性好等优点,为国内外学者最快接受和广为使用。用固定波长对薄层展开的各斑点作薄层扫 描的扫描图谱比目测的层析图谱更为客观准确,因而具有更好的指纹鉴别意义。林明美等对柴胡 10 个品种近 40 个样品进行了薄层指纹分析。将柴胡根中的挥发油、己 烷 提取物及甲醇提取物,分别进行薄层层析及薄层扫描。结果发现,皂苷d、a、c为柴胡属植 物的特征性成分。不同品种的柴胡,凡药材来源、外形区别显著者,其指纹图谱差异也显著 ,因此可根据图谱去推断药材的品种。颜玉贞等用经过优化的溶剂系统在双槽 展开箱中用硅胶薄层板作两次展开,对黄连所含原小檗碱型生物碱进行薄层色谱分离,在控 制条件下得到的商品黄连样品 TLC 中可检出包括微量生物碱在内的 9~11 个斑点,其荧光 及紫外扫描图可作为黄连药材的指纹图谱,以此确定不同黄连样品中主要生物碱的分布。苏 薇薇等对 10 个不同产地的黄芩样品,将乙醇、乙酸乙酯、乙醚提取液分别进 行了聚酰胺薄膜分析,从中提取反映样品间差异的数量化特征,用聚类分析的方法对黄芩进 行 鉴别分类,结果准确。
来源: 聂晶 《中草药》 2000年第31卷第12期 薄层色谱法具有快速、经济、操作简单、适用范围广、图象直观等特点。在实际的薄层层析中,有时因中药成分性质相近而难以分开时,可采用高效薄层层析法(HPTLC)。该方法是采用更细更匀的吸附剂,因而提高了分离效果,比经典薄层色谱提高3倍,最多可分离40种组分。聂孝平等用薄层色谱全程扫描的方法建立制剂的薄层指纹图谱,以特征峰有无来鉴别延胡索和夏天无。米莉莉等对不同虫草样品建立荧光淬灭薄层色谱指纹图谱,得到的荧光淬灭薄层色谱指纹图谱能为人工虫草和天然虫草提供直接的指纹鉴别。该方法快速简便、重现行好。但由于薄层板的质量和开放式层析系统等外界因素的影响,方法重现性较查,对实现的结果会产生一定的误差。
来源:喻录容? 《华夏医学》 2004年第17卷第4期
中国药典2005版一部中收载药品1146种,TLC法用于鉴别的已达1523项,用于含量测定的为45项。
来源:《中国药典2005版》《中国药典 2005 版薄层色谱彩色图谱集》
中国药典中定量分析更多的采用了液相色谱,薄层色谱方法很少,欧洲药典或美国药典中也是这种趋势。薄层色谱方法因其操作简单、灵敏等特点,在鉴别项目中应用较广,特别是中药指纹图谱大量采用了薄层色谱方法。因为以鉴别为目的,则采用数码成像分析为基础的第二代薄层色谱扫描仪体现出明显优势,仪器投入小,操作简便,结果更加直观。
博黛科技评注?? 2006.8
薄层色谱存档文档记录是GLP和GMP的基本要求,随着数码成像技术的发展,数码照相和电脑扫描正快速用于薄层色谱板的图像化存档。而具有荧光成像功能的第二代薄层色谱扫描仪将成为制药企业的首选。
博黛科技评注?? 2006.8
食品成分、农药残留、兽药残留、药品杂质、食品污染、毒素、毒品中药鉴别和含量分析:
254nm:葛根素、五味子、地榆、前胡、没食子、佛手柑脑、夏天无、穿心莲、栀子、防风
365nm:大黄、当归、虎杖、茜草、人参、黄芪、功劳木、灵芝、首乌、罂粟、青叶胆
原料药相关物杂质分析:
食品污染产生的毒素:
黄曲霉毒素B1(谷物,GB/T5009.22-20
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