不同西瓜品种枯萎病抗性鉴定方法比较.pdf

植保研究 ２０ 15.12 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＨＡＮＧＪＩＡＮＧ ＶＥＧＥＴＡＢＬＥＳ DOI:10.3865/j.issn.1001-3547.2015.12.019 不同西瓜品种枯萎病抗性鉴定方法比较 张屹 刘建雄 梁志怀 李基光 张云 ， ， ， ， （湖南省西瓜甜瓜研究所 ，长沙 ， ） 410125 摘 要 ：以 20 个不同类型的西瓜品种 为试验材料 ，采用室内苗期人工接种鉴定方法和分子标记检测方法进行比对 ， 研究不同西瓜品种对枯萎病的抗性差异及不同鉴定方法之间的关系 。 试验结果表明 ，人工接种鉴定与分子检测方法 鉴定结果基本吻合 ，CAPS 标记 （7716_fon ）可以将西瓜抗 、感枯萎病的界限有效定性为病株率 70% 。 关键词 ：西瓜 ；枯萎病 ；分子标记检测 ；人工接种鉴定 中图分类号 ： 文献标识码 ： 文章编号 ： （ ） S651 A 1001-3547 2015 12-0050-03 西瓜枯萎病是由西瓜枯萎病菌 （Fusarium oxys鄄 供 试 病 原 菌 为 西 瓜 枯 萎 病 菌 1 号 生 理 小 种 porum f ． sp． niveum ，FON ）侵染所致的土传维管束 （FON-1 ），由北京农林科学院蔬菜研究中心西瓜课 病害 ，是严重制约西瓜生产的病害之一[1~3] 。 已有文 题组许勇老师惠赠 。 献报道 ， 尖孢镰刀菌西瓜专化型生理小种有 4 个 ， 1.2 试验方法 、 、 和 ， 其中 ， 号生 理小种在我 国 致 病 力 最 接种鉴定方法 参照耿丽华等[9]报道的西瓜 0 1 2 3 1 ① 强 、存在范围最广[4] 。 因此 ，以 1 号生理小种为病原 苗期接种鉴定方法 ， 于 2014 年 5~7 月在湖南省西 菌株 ，开展西瓜品种枯萎病抗性评价具有很强的代 瓜甜瓜研究所基地大棚内进行 。 供试西瓜材料按编 表性 。 随着分子生物学的发展 ，研究者们已对西瓜 号播种于灭菌的沙子中 ，当西瓜幼苗长至 2 叶 1 心 枯萎病病菌 号生理小种的抗病基因 （ ）进行 时 ， 置于孢子浓度为 6 个 的西瓜枯萎病病 1 Fon-1 5×10 /mL 定位[5~8] ，并利用已开发的分子标记开展不同西瓜新 菌悬浮液中接种 15 min。 每个品种设置 3 个重复 ， 品种 Fon-1 基因的分布调查 ，为西瓜新品种抗性鉴 分别调查病株率 。 定提供了重要的依据 。 本文通过对 20 份不同类型 ②DNA 提取 待接种后 7 d 进行单株取样 ，采 西瓜品种进行抗枯萎病室内人工接种鉴定与分子 取 CTAB 法提取基因组 DNA[10] 。 检测分析 ，以期为西瓜抗病分子育种和抗源筛选提 ③PCR 反应体 系 均采用 12 μL ，包括 1.2 μL 供参考 。 10×Buffer （含 Mg2+ ），1 μL 2.5 mmol/L dNTPs ，1 μL