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饮料中霉菌酵母菌的检测.ppt饮料中霉菌酵母菌的检测.ppt
饮料霉菌和酵母菌检测
第三组
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实验目的
能阐述真菌的形态特征和生物学特征
能阐述食品霉菌和酵母菌检验的基本流程和注意事项
能阐述真菌毒素的危害和常见的检验方法
能阐述真菌产毒的影响因素和防治措施
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实验材料
1)器材
250mL锥形瓶2个 试管2个 1mL吸量管3个 20mL吸量管1个 10mL吸量管1个 100mL量筒1个 玻璃棒 平皿8个 电炉 洗耳球 250mL烧杯1个 天平 试管架 恒温箱(25℃-28℃) 酒精灯 空白载玻片 盖玻片 接种针等
2)培养基和试剂
马铃薯-------葡萄糖琼脂培养基、灭菌蒸馏水等
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实验流程
检样
报告
菌落计数
每皿中加入15----20mL马铃薯-----葡萄糖---琼脂培养基,28±1℃
选择2---3个适宜稀释度的样品匀液,各取1mL分别加入无菌培养皿内
10倍系列稀释
25g(mL)样品+225mL无菌蒸馏水,均质
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实验步骤
1.样品的稀释
(1)以无菌吸管吸取25mL样品至承有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶中,充分混匀、制成1:10的样品匀液。
(2)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,注入含有9ml灭菌蒸馏水的吸管内,充分震荡做成1:100的均匀稀释液。
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2.梯度稀释
取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中,另取一支1mL无菌吸管反复吹息,此液为1:100稀释液。按照此操作方法,制备10倍稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用一次1mL无菌吸管。根据污染状况的估计,选择2至3个适宜的稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释的同时,每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿中。同时分别吸取1mL样品稀释度加入2个平皿作空白对照。
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3.溶解培养基
及时将15至20mL的马铃薯--葡萄糖琼脂培养基倾注平皿中,并转动平皿使其混合均匀。
4.培养
待培养基凝固后,将平板倒置,28±1℃培养5d,观察并记录
5.菌落计数
肉眼观察,记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母菌数,以菌落形成单位CFU表示。
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实验结果
稀释度
平板1(CFU)
平板2(CFU)
平均值(CFU)
稀释度选择
1
酵母菌
多不可计
多不可计
多不可计
霉菌
1
1
1
√
10-1
酵母菌
多不可计
多不可计
多不可计
霉菌
0
0
0
10-2
酵母菌
232
362
297
√
霉菌
0
0
0
空白
0
0
0
酵母菌数报告值(cfu/mL)
297×100=29700≈30000=3.0×104≧10
霉菌数报告值(cfu/mL)
1×1=1.0≦10
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10-1
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稀释度为1
稀释度为1
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10-2
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空白
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实验结论
根据实验结果可知,我们组空白实验没有长菌,说明无菌操作做的很完善。
根据国标GB19296-2003可知,霉菌含量≦10cfu/mL,酵母菌≦10cfu/mL可知,酵母菌含量3.0×104cfu/mL大于10cfu/mL不符合国标规定,霉菌1.0cfu/mL≦10cfu/mL符合。
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