实验6 蟾蜍离体心脏灌流.ppt

* 实验六 蟾蜍离体心脏灌流 实验报告解析 收缩速度快而收缩力大，其收缩幅度与刺激强度及频率有关，收缩形式会发生改变；依赖于内源性Ca2+ 具“全或无”式收缩；其收缩幅度和刺激强度无关；在正常生理状态下不发生强直收缩，但有期前收缩和代偿间歇；依赖于外源性Ca2+ 收缩性 细胞内可进行信息的传导，但细胞与细胞间不能传递信息 肌细胞间以闰盘相接，具合胞体性质，故传导速度快 传导性 无 部分心肌细胞具自律性 自律性 绝对不应期远远小于收缩期 具较长的有效不应期，时间上相当于收缩期及舒张早期 兴奋性 腓肠肌（骨骼肌） 心肌 目的要求 基本原理 实验步骤 目的要求 1、学习两栖类动物离体心脏灌流的方法，掌握斯氏插管法。 2、了解心肌的生理特性，证明心脏具有自动节律性收缩的能力。 3、观察Na+、K+、Ca2+、肾上腺素、乙酰胆碱(ACh)对心脏活动的影响。 基本原理 实验步骤 4、理解内环境各种理化因素的相对恒定对于细胞进行正常生命活动的重要意义。 基本原理 心肌的自动节律性：心脏离体后，仍能有节律地自动舒缩。因而可用人工灌流的方法（如斯氏插管法或八木氏插管法等）进行离体心脏灌流，研究心脏活动的规律及特点。 由于两栖类动物的心脏没有冠状动脉，心肌细胞直接从心腔的血液中获得营养物质和氧气，故可用斯氏插管法进行离体心脏灌流。 灌流液的成分应同动物内环境的成分基本一致，两栖类动物心脏的灌流液为任氏液。始终有任氏液灌流于心腔，离体心脏可长时间地活动，改变灌流液的成分，则可引起心脏活动的改变。 目的要求 实验步骤 蟾蜍离体心脏灌流 实验步骤 1、蟾蜍离体心脏的灌流方法 2、不同离子溶液对蟾蜍心脏的影响 目的要求 基本原理 实验步骤 目的要求 基本原理 1、双毁髓—离体心脏制备 蟾蜍离体心脏的灌流方法 实验步骤 目的要求 基本原理 注意：①剪开动脉管壁时，使切口呈“V”字形，但勿剪断血管。 ②离体心脏时，一定要保留静脉窦，并用任氏液及时冲洗心室内的余血。 蟾蜍离体心脏的灌流方法 实验步骤 目的要求 基本原理 不同离子溶液对蟾蜍心脏的影响 2、用0.65％的NaCL溶液灌流，做好加药标记，观察心博变化，待曲线出现明显改变，立即用任氏液冲洗2～3次，并做好冲洗标志。 3、参照实验教程P171，分别向套管内滴加2～6滴5％NaCl溶液、1～3滴2％CaCl2溶液、1～2滴1％KCl溶液、1～2滴肾上腺素溶液、1～2滴乙酰胆碱溶液，观察心博曲线的变化。 注意： ① 每种试剂使用后，都要用新鲜任氏液冲洗2～3次，以待心搏恢复正常。 ②套管内灌流液的液面高度要尽量控制在一定高度，约2cm左右。 ③每项实验都要有对照。 ④滴加试剂的滴管要专用，每次滴加试剂时，要垂直直接滴到液面上。 *