IL-32γ对LX-2细胞表达Ⅰ型胶原的影响.pdfVIP

广东医学 2016年8月 第37卷第 15期 GuangdongMedicalJournalAug．2016，Vo1．37，No．15 ·2221· ij盛 出 千刍艺 IL一32^y对 LX一2细胞表达 I型胶原的影响 潘兴飞 ，张绍全 ，杨小安 ，邹小芳 ，魏立平 广州医科大学附属第三医院感染科 (广州510150)； 中山大学附属第三医院感染科(广州 510630) 摘【要】 目的 研究IL一327可否诱导肝星状细胞LX一2表达I型胶原(CollagenI)。方法 不同浓度的 IL一327与 Lx一2共培养，分别收集培养上清液、提取细胞总RNA，real—timePCR检测CollagenImRNA表达水 平，ELISA法检测Collagen I蛋白质表达水平。用不同浓度 的人重组磷酸化 p38 蛋白(recombinanthumanactive p38a蛋白)与LX一2细胞共培养，48h后收集细胞培养上清液，ELISA法检测Collagen I蛋白质表达水平。再用 不同浓度的p38MAPK抑制剂SB203580加入L)(一2细胞与IL一327共培养的培养液中，分别收集培养上清液，采 用ELISA检测 Collagen I蛋白质表达水平，同时提取细胞总RNA采用real—timePCR检测 Collagen ImRNA表 达水平。结果 IL一327诱导人LX一2细胞表达CollagenI，且其表达水平随IL一327浓度的增加而增强；人重组 磷酸化p38a蛋白可诱导Lx一2细胞表达 Collagen I增高，阻断p38MAPK可降低 IL一327诱导的Collagen I表 达。结论 IL一327通过活化p38MAPK通路诱导Lx一2细胞表达CollagenI，IL一327,／可能通过诱导肝星状细胞 表达CollagenI而参与肝纤维化的形成。 【关键词】 白细胞介素一32；p38MAPK；LX一2细胞；I型胶原 TheeffectofIL一32,／onCollagen IexpressionbyLX一2cells． PAN艇 -fei，ZHANGShao—quan，YANG Xiao—an，ZOUXiao—fang，WEILi—ping． DepartmentofInfectiousDiseases， 3rdAffiliatedHospital，Guangzhou MedicalUniversity，Guangzhou510150，China Correspondingauthor：WeiLi—ping．E —mail：weilp8@hotmail．com A【bstract】 Objective ToinvestigatewhethercouldIL一327induceCollagenIexpressioninLX一2cells． Methods LX 一2cellswereco—culturedwithIL一327ofdifferentconcentrations．ThentotalRNA wasextracted，and thecellsupernatantwascollected．Collagen IRNA expressionlevelwasassayedbyusingreal—timePCR．Collagen I proteinexpressionlevelwasdetectedbyusingELISA．Subsequently，LX 一2cellswereco—culturedwithrecombinant HumanActivep38ctproteinofdifferentconcentrations．Forty—eighthourslater，thecellsupernatantwascollectedand Collagen Iproteinexpressionlevelwasassessed．TheLX一2cellswerethenco—culturedwithIL一327．andp38MAPK inhibitorsSB203580ofdifferentconcentrationswereadded．Collagen IRNAandproteinexpressionlevelswereassessed byusingreal—timePCRandELISA．respectively．Results IL～327couldin