KN-93对肥大心肌细胞β-肌球蛋白重链及心钠素表达的影响.pdfVIP

广东医学 2012年6月第33卷第11期 GuangdongMedicalJournalJun．2012，Vo1．33，N(I．1l · 1527 · KN一93对肥大心肌细胞 l3一肌球蛋 白重链及 心钠素表达的影响术 林晓圳 ，董颀 ，石永英。，陈敏生 广州医学院第二附属医院心 内科、广州心血管疾病研 究所 (广州 510260)；。广州 医学院生理教研室 (广州 510182)；广州医学院第一附属医院老年科(广州510120) 【摘要】 目的 探讨钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)特异性抑制剂KN一93对大鼠心肌细胞肥大p一肌 球蛋白重链(B—MHC)mRNA和心钠素(ANF)mRNA表达的影响。方法 原代培养sD乳鼠心肌细胞，分为对照 组 (不加任何处理)、神经肽 Y(NPY)组(100nmol／LNPY)、KN一93组 (100nmol／LNPY+10I~mol／LKN一93)，分 别作用心肌细胞 24h后，采用激光共聚焦显微镜记录心肌细胞核钙 离子浓度的变化，Westernblot检测 CaMKII8 蛋白表达及荧光定量PCR检测心肌细胞 B—MHCmRNA和ANFmRNA的表达。结果 NPY刺激心肌细胞24h 后核钙离子浓度、CaMKII8蛋白表达及B—MHCmRNA和ANFmRNA表达明显增加。KN一93可抑制上述效应。 结论 CaMKII特异性抑制剂KN一93可抑制NPY诱导p—MHCmRNA、ANFmRNA表达。 【关键词】 KN一93；p—MHC；ANF；钙调蛋白激酶II；神经肽Y；心肌细胞；动物实验；大鼠 TheeffectsofKN一93on13一MHCandANFincardiomyocyteshypertrophy． HNXiao—zhen ．DONEQi。SHI Yong—ying，CHENMin—sheng． DepartmentofCardiology，SecondAffiliatedHospital，GuangzhouMedicalCollege， GuangzhouInstituteofCardiovascularDisease，Guangzhou510260，China Correspond ingauther：CHEN Min—sheng．E—mail：gzminsheng@ vip．163．con A【bstract】 Objective ToinvestigatetheeffectsofKN一93onp—MHCandANFexpressionincardiomyocytes hypearophyofrats．Methods TheprimarilyculturedcardiomyoeytesfromneonatalSprague—Dawley(SD)ratswere randomlydividedintothreegroups．Cellsweretreatedwith100nmol／LNPY (finalconcentration)inNPYgroup；with 100nmol／LNPYand10p．mol／LKN一93(finalconcentration)，whichwasaspecificinhibitorofealcium／calmodulin— dependentproteinkinaseII(CaMK lI)，inKN一93group；andnotreatmentincontrolgroup．After24h，theexpres— sionofintranuclearconcentration ofCa inrestingcardiomyocyteswasrecordedunderlaserscanningconfocalmicro— scope，CaMK Ⅱ8proteinwasassessedbyWesternblot，andmRANofp—MHCandANFwasquantifiedwithReal—time PCR．Results TheCa“concentrationinnucelus CaMK Ⅱ8protein，B—MHCmRNAandANFmRNA incardiomyo． ， cytesweresignificantlyincreasedbyNPY stimulation，whichwereinhibitedbyKN 一93．Conclusion KN 一93inhibits theNPY—inducedup—regulationofp—MHCmRNAandAN