MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）VEGF自分泌及体外成管作用的影响.pdfVIP

复 里亏搪 (医学版) 370 Fudan Univ J MedSci MDA—MB一231细胞源 exosome对人脐静脉 内皮细胞 (HUVEC)VEGF自分泌及体外成管作用的影响 隆 霜 沈 宜 谢莹珊 范维珂 姜 蓉 陈 黎 (重庆医科大学基础医学 院病理生理学教研室干细胞与组织工程研究室 重庆 4()0016) 【摘要】 目的 研究人乳腺癌 MDA-M13-231细胞源 exosome对人脐静脉内皮细胞 (humanumbiliealvein endothelialcell，HuVEC)血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)自分泌及体外成管作用 的影响，探讨肿瘤细胞源 exosome在肿瘤微环境中对血管内皮细胞血管生成的调控作用。方法 低温超速离心 及密度梯度离心法提取乳腺癌 MDA_M 231细胞源 exosome；酶联免疫 吸附试验 (ELISA)检测 HUVEC与 exosome共培养 24h后上清液中VEGF的变化水平IWesternbtOt技术检测HUVEC与 exosome共培养24h后 VEGF、VEGFR2及 PVEGFR2的蛋 白表达情况；RT-PCR法检测 HUVEC与 exosome共培养24h后VEGF的 基因表达情况；观察HUVEC与 exosome共培养 24h后的体外成管能力。结果 HUVEC与 exosome共培养 24h后上清液中VEGF为(110．8511-。18．404pg／mL，与对照组相 比差异具有统计学意义(P0．05)；Western blot结果显示 ，HUVEC与 exosome共培养 24h后 VEGF和 p-VEGFR2的蛋 白表达水平均增加 (P0．05)； RT-PCR结果显示 ，HUVEC与 exosome共培养 24h后 VEGF的基 因表达水平增加(P0．05)；体外成管实验 显示，exosome显著提高了HUVEC的管腔形成能力 (PO．05)。结论 乳腺癌 MIDA—MB-231细胞源 exosome 促进了血管内皮细胞 VEGF的表达及分泌，激活了血管内皮细胞 VEGF／VEGFR2自分泌环并提高了血管 内皮 细胞的体外成管能力，对促肿瘤血管生成有一定的调控作用。 【关键词1 exosomet， 血管内皮生长因子(VEGF)； 血管生成 ； 乳腺癌 【中图分类号】 R730．23 【文献标志码】 A doi：10．3969j．issn．1672—8467．2012．04．008 Effectsofexosomesderivedfrom M DA—M B一231ontheexpressionof autocrineVEGF andcapillary—liketubeformation inHUVECs LONG Shuang，SHEN Yi△，XIE Ying—shan，FAN W ei—ke，JIANG Rong，CHEN Li (Institute0’StemCellandTissueEngineering，Department0／、Pn 0户矗 ofog ，CollegeoJBasicMedicine， ChongqingM edicalUnivercity，Chongqing400016，China) [Abstract] Objective Toinvestigatetheeffectsofexosomesderivedfrom breastcancercellline MDA—MB-231ontheexpressionofautocrinevascularendothelialgrowthfactor(VEGF)andcapillary- 1iketubeformationinhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)，andtoobservetheregulatory effectofexosomesderi