野生天麻dna导入马铃薯实现-广西植物.pdf

维普资讯 广 西 植 物 Guihaia 25(4)：353— 355 2005年 7月 野生天麻DNA导入马铃薯实现 遗传转化的研究 周鹤峰 ，邵 敏2，葛正龙2 (1．遵义医学院珠海校区生物 工程教研室 ．广东珠海 519041；2．遵义医学院生物化学教研室 ，贵州遵义 563003) 摘 要：采用浸苗法将野生天麻总 DNA导入马铃薯试管苗，对筛选得到的转化植株进行蛋白及药用成份 的 分析。结果显示 ：(1)在 200株转化的马铃薯 中有 21株 的紫外扫描图谱与正常对照组有显著差异 ，且在 220nm有明显吸收峰。(2)5株经 PCR扩增出野生天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因。(3)转基因马铃薯与正常 马铃薯的蛋 白表达有明显差异 ，并且在转基因马铃薯 中有一条与野生天麻抗真菌蛋白(GAFP)相同的条带。 而正常马铃薯中无此条带。(4)通过薄层层析法检测出3株转基因马铃薯表达野生天麻的有效药用成份天麻 素。说明采用浸苗法进行外源总DNA导入是可行的。 关键词：野生天麻 ；浸苗法 ；天麻素；转基因 中图分类号：Q943．2 文献标识码：A 文章编号：1000-3142(2005)04-0353-03 A genetictransformation studyofintroducing wildGastrodiaelata DNA intopotato ZHOU He—feng ，SHAO M in ，GE Zheng—long (1．DepartmentofB 0Pn耳nPP—n ，ZhuhaiCampus，ZunyiMedicalCollege，Zhuhai519041，China； 2．DepartmentofBiochemistry。ZunyiMedicalCollege，Zunyi563003．China) Abstract：Afterthetuberhadgrownup，thesolutionofgastrodinwasextractedfrom thepotatoeswhichwere transformedbywildGastrodiaelataDNA．SDSwasusedtOanalyzeGAFPgene．TLCwasusedtOan- alyzethegastrodinoftransformedpotatoes．Results：(1)21transformedplantshadobviousobsorptionpeakat 220nm in200transformedpotatoes．(2)ThefragmentofwildGastrodiaelata GAFPgenewasfoundbyPCR from 5transformedplants． (3)Theproteinexpressionsintransgenicpotatoeswereobviouslydifferentfrom normalpotatoes；A bandwasdetected in transgenicpotato andwildGastrodiaelata，butwasn tdetected in normalpotatoes．(4)W edetectedtheexpressionofthegastrodinbyTLCfrom 3transformedplants．Itisfea- sibletOusethesoakingseedlingmethodtOintroduceexogenousDNA intoplants． Keywords：wildGastrodiaelata；soakingplantletsmethod；gastrodin 野生天麻 (Gastrodiaelata，BI)属兰科 ，是名贵 法”、“浸泡法”等方法将外源 DNA导人植物已成为 传统中