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无忧食品检测的技巧和工具 作者：Jason Link安捷伦产品经理 Mike Chang安捷伦样品前处理应用化学家 每一位食品化学家都清楚全球化的食品源和供应链正变得日趋复杂。 全球化的发展推动着对详细分析营养价值、组分和来源的需求不断增长。 另外，对食品安全以及对人类健康影响的关注使得食品检测法规和要求大大提高。 这些需求促使快速、可靠和高通量的分析方法不断发展。 但是，食品种类极其丰富。 它们通常比较复杂，含有极性很强的分析物，且可能包含许多感兴趣的残留物。 因此，最佳的分析过程必须采用适当的色谱方法和样品前处理方法。 现代色谱柱技术和样品前处理方法可以轻松快捷地实现食品分析。 新型色谱柱技术采用卓越的方法 亚 2 μm 颗粒在 UHPLC 应用中日益流行，尽管它们可能需要特殊的仪器才能充分发挥其性能。 安捷伦采用Poroshell 120这项新型替代技术，提供亚 3 μm 的表面多孔填料。 在两种情况下，粒径都小于 3 μm，克服了传统 HPLC 系统的局限。 但是，这两类色谱柱也可用于传统 HPLC，只是需要在仪器压力限值附近谨慎使用。 我们应当认识到这些新型固定相并不神奇——它们与大多数分析人员多年来使用的 5 μm 颗粒色谱柱的色谱原理完全相同。 这是好消息，因为我们可以采用相同的方法开发过程，但现在可以利用卓越的方法并获得卓越的结果。 按照可靠的液相色谱方法常规步骤进行食品分析 为确保使用亚 2 μm 或亚 3 μm 粒径的色谱柱分析食品时获得卓越的结果，务必遵守下列这些重要步骤： 选择色谱类型——反相色谱（C18，极性嵌入等）或亲水相互作用液相色谱 (HILIC)，HILIC 尤其适用于在传统 HPLC 方法中保留性能不佳的较小的极性分析物 选择适当的起始和结束梯度 调节 pH，使分析物保留特性稳定，并具有较好的 k’ 值 改变键合相，获得良好的峰间距和分离度 选择适合您的食品分析应用的最佳样品前处理方法 理想的样品前处理方法具有快速、简便、重现性高等特点，并且适合您正在分析的食品。 QuEChERS 样品前处理方法极易使用，是食品样品分析的理想选择，尤其适用于固态食品样品或不透明液态样品。 SPE 适合痕量分析，因为它具有较高的灵敏度，且具有内置的浓缩步骤，使用较小体积的液体进行洗脱和/或蒸发和复溶。 液液萃取是一项传统的分离技术，但根据所需浓度不同，该过程可能比较耗时。 过滤是最简单的样品前处理方法。 机械过滤器或经过专门设计的除脂过滤板（如安捷伦 Captiva ND 除脂滤板）都可用于去除颗粒物。 优化的食品检测工作流程能够确保获得良好的结果 此处给出了一个较好的食品检测工作流程示例，以尼古丁作为分析物。 尼古丁是从烟叶中提取出来的，被用作杀虫剂。 但是，它可能进入水系统并被鱼类及其他水生生物吸收。 它是欧盟禁用的一种杀虫剂，在美国将从 2014 年 1 月份起禁用。 当尼古丁进入食品样品，尤其是固态食品样品（如鱼类）时，首选的样品前处理方法是 QuEChERS。Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒经过预制，可实现简便易行的萃取和分散 SPE，本例中样品前处理时间仅 15 分钟（图 1）。 萃取* 1 将 10–15 g 样品加入 50 mL 的 Bond Elut QuEChERS 萃取管中（如有需要，在步骤 1 或 2 中调节 pH。在分析尼古丁时，在步骤 1 中须将 pH 调节至 ≈ 11。） 2 加入 10–15 mL 乙腈 3 用手振荡几秒钟，使其混合均匀 4 加入盐包和可选的陶瓷均质子（强烈推荐使用陶瓷均质子改善混合效果） 5 重复步骤 3，但用手振荡大约 1 min 6 离心 5 min 分散 SPE** 7 将上层乙腈转移至分散 SPE 管中 8 离心 5 min 9 将上清液转移至自动进样器样品瓶中，并进样至 LC/MS/MS * 在萃取过程中，使用 Bond Elut QuEChERS AOAC 萃取试剂盒（部件号 5982-5755CH）。 在步骤 1 中，将两 2 g 鱼类样品加入 13 mL 水中得到 15 g 样品。 ** 在分散 SPE 中，使用 Bond Elut QuEChERS 分散 SPE 试剂盒（部件号 5982-5122）。 图 1. Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取流程 放大图片 图 2. 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 进行样品前处理并在 Agilent Poroshell 120 HILIC 色谱柱上进行分离，以苦参碱作为内标物，获得了基线分离的 MS 色谱图。 在选择适当的液相色谱技术时，HILIC 非常适合于极性分析物（如尼古丁）分析，