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沉默survivin对增加晚期宫颈癌基因放疗效果的实验研究.pdf
· 692 · 医学研究生学报2010年7月 第23卷 第 7期 JMedPostgra,Vo1.23,No.7,July,2010
论 著
(基础研究)
沉默 survivin对增加晚期宫颈癌基因放疗效果的
实验研究
马 荣,唐丽萍,耿晓星,傅松滨
[摘要】 目的 探讨 survivin表达抑制与晚期宫颈癌放疗敏感性的关系。 方法 设计并构建靶 向survivin的shRNA
真核表达载体 (psh—SVV),转染宫颈癌 Hela细胞 ,用实时PCR法检测 RNA干扰 (RNAinterference,RNAi)后 survivinmRNA的
表达 ,用Westernblot检测 survivin蛋 白表达,观察survivin基因沉默后放射线对Hela细胞生长活性的作用 ,转染psh—SVV对Hela
细胞凋亡的影响,裸鼠移植瘤生长速度及对放射线敏感性的变化。 结果 测序结果证实载体构建成功。转染 psh-SVV的实
验组 survivinmRNA表达明显低于 3个对照组,差异具有统计学意义 (P0.05)。实验组 survivin蛋 白表达亦明显低于 3个对
照组 ,差异具有统计学意义 (P0.05)。放疗后72h实验组细胞生长抑制率明显高于 3个对照组,差异具有统计学意义 (P
0.05)。实验组 caspase-3活性显著高于其他 3组 (P0.05)。survivin基因沉默后,裸 鼠移植瘤生长速度减慢,survivin低表达
的实验组小鼠对放射线敏感。 结论 psh—SVV通过 RNAi有效降低宫颈癌Hela细胞 survivin的表达 ,抑制 Hela细胞增殖 ,诱
导凋亡 ,增加Hela细胞对放射线的敏感性。
[关键词】 Survivin;基因放疗 ;晚期宫颈癌
[中图分类号】 R815 【文献标志码】 A [文章编号】 1008—8199(2010)07-0692-05
RNAinterferenceagainstsurvivinenhancestheeffectofgenetic-radiotherapyonadvancedcervical
cancer
MA Rong,TANG Li—ping,GENG Xiao—xing,FU Song-bin
(DepartmentofGynecology,TumorHospitalAffiliatedtoHarbinMedicalUniversity,Harbin150040,Heilongfiang,
China)
[Abstract] objective ThepurposeofthisstudywastoinvestigatetherelationshipbetweenRNAinterferenceagainstsurvivin
andtheradiosensitivityofadvancedcervicalcancer. M ethods W edesignedandestablishedtheshRNAcukaryoticexpressionvector
(psh—sw)targetingsurvivin,andtransfectedHelacellswithpsh—SVV.ThenwedetectedtheexpressionsofsurvivinmRNAandsurvivin
proteinfollowingRNAinterference(RNAi)byreal—timePCTandWesternblot,andobservedtheeffectofX—rayonthegrowthactivity
ofHelacellsafterthesurvivingenesilencing,theinfluenceofpsh—SVVtransfectiononcellapoptosis,andthegrowthandradiosensitivity
ofthexenograftinthenudemice. Results Thesequencingtestconfirmedthesuccessfulestablishmentofpsh—SVVagainstsurvivin.
BoththeexpressionsofsurvivinmRNA andsurvivinproteinweresignificantlylowerinthepsh—SVVtransfectedgroupthanintheother
threecontrolgroups(P 0.05),while
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