比较两种裸鼠人肝癌转移模型.pdf

维普资讯 四川医学2005年 3月第 26卷 (第 3期) SichuanMedicalJournal，2005，Vo1．26，No．3 ·281 · 比较两种裸鼠人肝癌转移模型 李敬东 ，李 波 ，郑本波 ，魏永刚。，魏大鹏 ，白绍槐 (1．川北医学院附属医院，四川 南充 637000；2．四川大学华西医院，四川 成都 610041) 【摘要】 目的 对两种裸鼠人肝癌转移模型进行 比较。方法 分别采用直接注射法和瘤块肝包膜下嵌入法制作裸 露人肝癌转移实验动物模型，观察接种阳性率、肿块大小、生长速度、肝邻近脏器浸润转移情况。结果 接种后2周直接 注射法争瘤块嵌插 法接种 阳性率分别为85％、9o％(P0．05)，肿块大小分别为 (2．00±1．90)O101、(8．11±2．70)mm(P O．05)，肺转移率 100％，前者生长速度慢于后者。结论 两种裸 鼠肝癌模型制作方法均为理想，直接注射法简便、易行 ， 但 瘤块嵌插法肿瘤生长速度较快 。 【关键词】 裸鼠；肝癌 ；动物模型 【中图分类号】 R735．7 【文献标识码】 B 【文章编号】 1004—0501(2005)03．0281—02 裸鼠移植型人肝癌模型已经成为肝癌实验研究理 直接注射法收集处于对数生长期的HCCLM，肝癌 想的动物模型。成功地制作肝癌实验动物模型对于治 细胞，制成单细胞悬液，浓度为 5×1o6／0．2ml细胞，每 疗开展起着至关重要的作用。笔者在裸鼠人肝癌高转 只裸鼠肝包膜下注射 1ml，细胞数量为 2．5×107，用 移模型制作中采用 了两种不 同的方法 ：瘤块嵌插法和 0．6％的戊巴比妥钠 2—3ml行腹腔注射麻醉，手术野 直接注射法，并对这两种方法的优缺点进行对 比分析。 皮肤消毒 ，取左肋缘下切 口，长约 lcm，逐层入腹，显露 肝左叶，并用手挤出肝左叶于切 口外 ，注射针头斜行进 1 材料与方法 针 ，刺人肝脏约0．3cm左右 ，缓慢推人肿瘤细胞。拔针 1．1 实验动物：4—5周龄的BALB／cnu／nu裸小鼠、雌 后，即用棉签按压，勿需缝合，观察无活动性出血后 ，轻 雄不分 (四川大学实验动物中心提供)，SPF级，体重 送肝脏还纳腹腔 ，逐层关腹。亦接种 20只。 15—20g，四川大学实验动物中心裸鼠室分笼饲养。 1．5 统计学方法：采用计量资料的 t检验 ，计数资料 1．2 主要试剂和器材：DMEM培养基 (美 国Hyclon公 的．)c检验 ，检验水准 a选取0．05。 司)；胎牛血清 (华美生物制品公司)；CO2培养箱 (华东 2 结 果 电子仪器设备厂)。 1．3 细胞培养 ：HCCLM3细胞株(购 自上海复旦大学肝 接种阳性率 ：两组裸 鼠分别采用不 同的方法接种 癌研究所)，用含 4．5g／~l葡萄糖 的DMEM培养液培 后 2周，剖腹检查 ，结果发现：采用直接注射法接种肿 养，补充小牛血清、青霉素(100U／m1)及链霉素(100~g／ 瘤的20只大鼠肝脏左外叶出现明确低密度灶者共 17 In1)，常规37℃、5％cO2、饱和湿度下培养。每 3d换液 只，均为单发病灶，接种阳性率 85％；采用瘤块嵌插法 1次。 接种肿瘤的2O只大 鼠肝脏左外叶出现低密度灶者共 1．4 裸鼠人肝癌高转移原位移撞模型的建立方法 ：瘤 15只，亦均为单发病灶 ，接种 阳性率 75％，两者 比较 块嵌插法 ：收集处于对数生长期的细胞，制成单细胞悬 P0．05，无显著差异。 液，取5×10／0．2ml细胞注射于裸 鼠腋下的皮下 ，于3 肿块大小 ：肿瘤接种 2周后，直接