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流体切应力作用下破骨细胞组织蛋白酶K的表达.pdf
实用 口腔医学杂志(JPractStomato1)2013Jul,29(4) ·459·
流体切应力作用下破骨细胞组织蛋 白酶 K的表达
董强 夏茜 周建奖 马洪 王永 廖健 梁星
【摘要】 目的:研究流体切应力作用下大鼠破骨细胞组织蛋白酶K(CatK)mRNA的表达变化。方法:1,25一(OH):D,/地塞
米松联合诱导sD大鼠骨髓细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、甲苯胺蓝染色和扫描电镜观察鉴定破骨细胞 ,0.25%胰
蛋 白酶/0.02%EDTA进行细胞纯化。对纯化后的破骨细胞施加不 同力值和作用时间的流体切应力 ,实时荧光定量巢式
RT—PCR检测CatKmRNA的表达。结果:随着力值的增加 (0.9~18.7dyne/cm )和作用时间的延长 (15~60min),破骨细胞
组 CatKmRNA的表达量分别呈下降趋势 (P0.05)。结论 :大鼠破骨细胞CatKmRNA的表达水平与一定范围的流体切应
力力值的大小和加载时间呈负相关。
【关键词】破骨细胞;流体切应力;组织蛋 白酶K
Theexpression ofcathepsinsK inculturedosteoelastsafterfluidshearstressstimulatiOn
DONGQiang,XIAQian,ZHOUJianjiang ,MA ,WANG ,LIAOJian,LIANGXing.1.550004,
DepartmentofStomatology,TheAffiliatedHospitalofGuiyangMedicalCollege,China;2.KeyLaboratoryofMedi—
calMolecularBiologyofGuizhouProvince,Guiyang;3.DepartmentofProsthodontics,耽 ChinaCollegeofStoma—
tology。SichuanUniversity,Chengdu
【Abstract】Objective:TostudyeathepsinsK(CatK)mRNAexpressioninosteoclastsstimulatedbyfluidshearstress.Methods:
ThebonemarrowcellsofSDratswereculturedwiththepresenceof1,25·(OH)2D3anddexamethasone,theosteoclast—likecellswere
identifiedbytartrate—resistantacidphosphatase(TRAP)staining,toluidinebluestainingandSEMobservation,thenpurifiedwithtryp-
sin/EDTA.Differentvaluesandlastingtimeofsteadyfluidshearstresswereexertedontheosteoclastsbyaparallelplateflow system.
CatK expressionofosteoclastswasdetectedbyreahimeRT—PCR andnestedPCR.Results:ThelevelsofCatKmRNA weredown—
regulatedwiththeincreaseofstressvMue(0.9~18.7dyne/em )andexposuretime(15—60min)(P0.05).Conclusion:Acer—
tainrangeofsteadyfluidshera stressmaydown —reuglatetheexpressionofCatK inosteoclastsstrength—and—time-dependently.
【Keywords】 Osteoclast;Fluidshearstress;CathepsinsK
中图分类号 :R318.01 文献标志码 :A doi:10.3969/j.issn.1001—3733.2013.04.001
骨组织的改建受到激素和机械信号的调控。内环 K)是破骨细胞中特征性高表达的溶酶体酶,在骨基质
境的稳定主要通过激素调节,而功能性应变下发生的 的降解和改建中发挥关键作用…。本研究对纯化后
局部骨改建则维持着骨组织结构的完整性。研究骨细
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