对mcao模型大鼠血脑屏障通透性的时效性影响-天津中医药大学.pdf

圆园15 11 月第32 卷第 11 期 天 津 中 医 药 Nov援 圆园15熏灾燥造援32 晕燥援11 栽蚤葬灶躁蚤灶 允燥怎则灶葬造 燥枣 栽则葬凿蚤贼蚤燥灶葬造 悦澡蚤灶藻泽藻 酝藻凿蚤糟蚤灶藻 679 DOI ：10.11656/j.issn.1672-1519.2015.11.11 “活血开窍汤”对MCAO 模型大鼠血脑屏障 通透性的时效性影响* 1，2 1 2 3 赵金生 ，孟凡征 ，殷 韵 ，李 平 （1.天津市南开医院脑病科，天津 300 100 ；2.天津医科大学，天津 300070 ；3.天津市第三中心医院，天津 300170） 摘要：[ 目的] 探讨“活血开窍汤”不同给药时间对大脑中动脉梗死（MCAO ）模型大鼠神经功能恢复及血脑屏障的 时效性影响。[方法] 将48 只MCAO 模型Wistar 大鼠随机分为模型组及活血开窍汤治疗组（玉组：造模后2 h 给药组； 域组：造模后24 h 给药组；芋组：造模后48 h 给药组），每组 12 只，另有 12 只大鼠作为假手术组。采用Zealonga 评分 法观察各组大鼠神经功能缺损情况，取材前2 h 于尾静脉注射伊文思蓝（EB ）溶液以观察各组大鼠血脑屏障（BBB ）的 通透性，免疫组化法观察各组大鼠脑组织Claudin-5 蛋白含量情况。[结果] 各治疗组大鼠神经功能较模型组均有改 善，且差异具有统计学意义（约园援园缘）。活血开窍汤域、芋组大鼠脑缺血侧纹状体EB 含量 于模型对照组（P约0.05 ）， Claudin-5 蛋白含量相对较高（P约0.05 ）。而活血开窍汤玉组与模型对照组相比，活血开窍汤域组与芋组相比，差异均 无统计学意义（P跃0.05 ）。[结论] 活血开窍汤可通过减轻BBB 通透性，减少Claudin-5 蛋白的破坏从而 护MCAO 大 鼠血脑屏障，但在急性期对BBB 的 护作用并不十分明显，且尚不能证明在非急性期越早给予活血开窍汤对BBB 的 护作用就越显著。 关键词：活血开窍汤；大脑中动脉梗死；血脑屏障；Claudin-5 蛋白 中图分类号：R743.32 文献标志码：A 文章编号：1672- 1519（2015 ）11-0679-05 “活血开窍汤”是由导师李平教授总结出的治 1.2 实验试剂及仪器 伊文思蓝（EB ）染料（北京 疗脑梗死有效的方剂，经多年临床实践证明，此方 化学试剂公司），Claudin-5 上下游引物（上海生物工 具有活血开窍、通络补肾的作用，在治疗脑梗死方 程），4%多聚甲醛、肝素液、注射用青霉素钠、甲酰胺 [1-2] 面具有肯 的疗效。本课题组早期的实验 已证 溶液（天津爱基生公司），造模所需手术器械（上海 实，活血开窍汤对大脑中动脉缺血再灌注损伤模型 钟医疗器械厂），直径0.26 mm 鱼线（日本PATU 公 大鼠有一 的脑 护作用，可有效改善模型大鼠的 司），恒温冰冻切片机、SDC-6 温恒温槽（Leica 公 神经功能。而本实验在上述研究的基础上通过观察 司），温 心机、超声波粉碎机、移液枪（Eppendorf 活血开窍汤不同给药时间对大脑中动脉缺血模型 公司），BECKMAN 超高速 心机（美国贝克曼仪器公 （MCAO ）大鼠血脑屏障（BBB ）通透性以及脑组织 司），Motic AE31 荧光显微镜（Motic 公司）。 Claudin-5 蛋白含量的影响，来探讨活血开窍汤对 1.3 MCAO 模型的制备及分组 将大鼠饲养3 d MCAO 大鼠血脑屏障的 护作用机制，以期为临床 后禁食24 h ，采用Zea-Longa 线 法[3]制备大鼠左侧 用药提供实验依据。 MCAO 模型：10%水合氯醛 （0.3 mL/ 100 g ）腹腔注 1 材料与方法