马铃薯腐烂茎线虫14－3－3基因的克隆与序列分析-云南农业大学.pdf

云南农业大学学报 （自然科学），２０１６，３１（Ｓ１）：１２－１７ ｈｔｔｐ：／／ｘｂｙｎａｕｅｄｕｃｎ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ） Ｅｍａｉｌ：ｘｂ＠ｙｎａｕｅｄｕｃｎ ＤＯＩ：１０１６２１１／ｊｉｓｓｎ１００４－３９０Ｘ（ｎ）２０１６Ｓ１００３ 马铃薯腐烂茎线虫１４－３－３基因 的克隆与序列分析 １ １ ２ １ 彭　焕 ，黄文坤 ，胡先奇 ，彭德良 （１．中国农业科学院植物保护研究所，植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 １００１９３； ２．云南农业大学，农业生物多样性应用技术国家工程研究中心，云南 昆明６５０２０１） 摘要：马铃薯腐烂茎线虫 （Ｄｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓｄｅｓｔｒｕｃｔｏｒ）是为害中国甘薯生产的主要病原物之一，由它所引起的甘薯茎 线虫病，每年造成严重的经济损失。１４－３－３蛋白是真核生物特有，具有高度的保守性，且在信号转导代谢调 控、激素信号传导、细胞分裂和对生物和非生物刺激的应答反应等过程起到重要作用。本研究采用ＥＳＴ分析和 ＲＡＣＥ克隆相结合的方法，从马铃薯腐烂茎线虫中成功克隆出一个１４－３－３蛋白基因 （Ｄｄ－１４－３－３ａ，Ｇｅｎ ＢａｎｋａｃｃｅｓｓｉｏｎＮＯ．：ＡＤＷ７７５２７１）。Ｄｄ－１４－３－３ａｃＤＮＡ全长为９８６ｂｐ，包含一个长度为７５６ｂｐ的开放阅读 框，编码着一个长度为２５１ａａ的蛋白质。Ｂｌａｓｔ比对结果表明：Ｄｄ－１４－３－３ａ蛋白与已报道的南方根结线虫 （Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｉｎｃｏｇｎｉｔａ）、松材线虫 （Ｂｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓ）、大豆胞囊线虫 （Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａｇｌｙｃｉｎｅｓ）以及水稻干 尖线虫 （Ａｌｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｅｓｂｅｓｓｅｙｉ）中的１４－３－３蛋白的一致性分别为９８％、９８％、９８％和９７％。对该蛋白结构的 分析结果表明：Ｄｄ－１４－３－３ａ蛋白包含一个典型的１４－３－３蛋白结构域，且无信号肽和跨膜结构域。该基因 的克隆和分析将有助于明确植物寄生线虫１４－３－３蛋白在线虫侵染和与寄主互作中的作用。 关键词：马铃薯腐烂茎线虫；１４－３－３蛋白；基因克隆；序列分析 中图分类号：Ｓ４３５３２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００４－３９０Ｘ（２０１６）Ｓ１－００１２－０６ ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＳｅｑｕｅｎｃｅＡｎａｌｙｓｉｓｏｆａＮｏｖｅｌ １４－３－３（Ｄｄ－１４－３－３ａ）ＧｅｎｅｆｒｏｍＤｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｄｅｓｔｒｕｃｔｏｒｏｎＳｗｅｅｔｐｏｔａｔｏ １ １ ２ １ ＰＥＮＧＨｕａｎ，ＨＵＡＮＧＷｅｎｋｕｎ，ＨＵＸｉａｎｑｉ，ＰＥＮＧＤｅｌｉａｎｇ （１．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＢｉｏｌｏｇｙｏｆＰｌａｎｔＤｉｓｅａｓｅｓａｎｄＩｎｓｅｃｔＰｅｓｔｓ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｃｈｉｎｅｓｅ ＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１９３，Ｃｈｉｎａ； ２．ＴｈｅＮａｔｉｏｎａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＡｇｒｉｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙＡｐｐｌｉｅｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ， ＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０２０１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｐｏｔａｔｏｒｏｔｎｅｍａｔｏｄｅ（ＤｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓｄｅｓｔｒｕｃｔｏｒＴｈｏｒｎｅ，１９４５）ｉｓ