chapter01遗传病的常规诊断.ppt

1.病史采集 遗传病的个人病史和家族史的采集与常规疾病相似，但需问清一些重要的细节： 2.体格检查 因为遗传病的患者及其家属常常具有较大的心理压力，所以检查病人的时间要充裕，环境要安静。 遗传性疾病可能影响许多器官、系统，因此体格检查必须全面，既要注意明显的体征、也要注意细微的异常迹象。 智力低下 黄疸 白内障 肝脾肿大 面似满月 生长缓慢 哭声象猫叫 系谱分析的原则 系统完整 去伪存真 注意新的基因突变 1.1 常染色体显性遗传病 1.2 常染色体隐性遗传病(AR) 1.3 X连锁显性遗传病 1.4 X连锁隐性遗传病 1.5 Y连锁遗传病 2.1 线粒体遗传病 母系遗传，女性患者的子女都可能发病。 晚发，进行性。 2.2 多基因病 3.具有特殊遗传方式的疾病 1.核型分析 染色体检查的指征 1.明显的生长发育异常,多发畸形,智力低下者; 2.多发性流产和不育的夫妇; 3.性腺以及外生殖器发育异常者; 4.原发性闭经; 5.35岁以上的高龄孕妇; 6.已经生有染色体异常患儿的夫妇; 7.身材高大,性情粗暴的男性; 8.恶性血液病患者 9.长期接受X线,电离辐射的人员. 2.性染色质检查 Y染色质检查 X染色质检查 3.荧光原位杂交技术检查 生化检查 主要是对蛋白质和酶结构或功能的检测; 特别适用于分子病,先天性代谢病,免疫缺陷等遗传病的检查； 材料主要有血液/活检组织/粪便/脱落细胞/尿/阴道分泌物等。 1.基因诊断的特点 直接以基因作为检测对象，具有其他临床诊断方法所没有的特点： 针对性强、灵敏度高、特异性高、适应性强等。 2.基因诊断的基本途径 2.1 直接诊断 直接检测致病基因本身的异常 2.2 间接诊断 多态性连锁分析 ① 选择要分析的基因座位 ② 确定应用的分析方法 ③ 选择合适的家系 ④ 对家系中的各个成员进行表型分析 ⑤ 分析、判断并解释得到的结果 3.基因诊断的方法 常用于基因诊断的方法有分子杂交、聚合酶链反应（PCR）和聚合酶链反应－单链构象多态（PCR-SSCP）分析。 此外，近年来随着分子遗传学基础研究的发展，在DNA多态性连锁分析的临床诊断中，除了应用RFLP分析，还广泛应用了STR、SNP和DNA芯片技术。 3.1 分子杂交（molecular hybridization) 分子杂交是现代分子生物学技术的基础，是根据碱基互补配对原理，利用标记探针鉴定核酸序列中密切相关的分子方法。 在DNA、RNA和蛋白质不同水平常用相应的杂交方法有三种，即Southern印迹、Northern印迹和Western印迹。 A. Southern 印记杂交 B.Northern 印记杂交 原理：在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，继而按照同Southern Blot相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。 用途：检测样品中是否含有基因的转录产物（mRNA）及其含量。 3.2 PCR PCR-SSCP PCR-RFLP PCR-STR A.PCR-SSCP 当双链DNA变性为两条单链后，各自会在中性条件下形成各自特定的空间构象，因而在电泳时将在不同的位置上出现各自电泳条带。 如果DNA序列发生变化，甚至只有一个碱基变化，空间构象也有可能发生变化，电泳条带也随之变化。 B.PCR-RFLP C.PCR-STR 3.3 基因芯片 利用核酸杂交的原理，应用于DNA、RNA的研究 基因芯片的应用 用于基因转录水平的检测、基因组分析和后基因组研究 美国斯坦福大学Davis等用PCR法从外周血淋巴细胞cDNA文库中得到了1046种cDNA片段，制成芯片，然后与热处理的T淋巴细胞和未处理的T细胞种提取的mRNA反转录出的单链cDNA片段杂交，经激光共聚焦扫描系统分析，共发现17个差异表达的基因，其中11个是被热诱导的，6个是被热抑制的。经序列分析证实，其中3个是未报导的新基因。 4.疾病分子诊断所带来的问题 准确性 稳定性 复杂性 基因歧视 1.现症病人的诊断 明确的临床诊断 相对比较容易 确定其遗传规律 遗传异质性 患病对后代的影响很难确定 2.携带者的检出 携带者 携带有隐性致病基因，本人表现正常的个体； 携带有显性致病基因，但没有外显的正常个体； 携带有致病基因，迟发个体； 染色体平衡易位或倒位的个体。 临床水平:只能提供线索,不能确诊.如部分血友病基因的杂合子具有损伤后轻度出血倾向; 细胞水平:染色体检查,细胞培养和组织化学测定; 酶与蛋白质水平:主要是生化检查; 基因水平:对单基因病的检查具有独特的优势,是以后发展的方向. 3.遗传病的产前诊断 原理：将待检测的DNA分子用/不