胚胎干细胞的培养.ppt

体外受精和 胚胎体外培养 胚胎移植、 胚胎分割、 胚胎干细胞 讨论：为什么胚胎移植能成功? 移动到任何一头动物子宫内都能发育吗? 同种动物发情排卵后，在一段时间内供体\受体具有相同的生理环境。 为什么能收集到胚胎? 早期胚胎一定时间内处于游离状态。 供体和受体会不会发生排斥？ 同种动物之间基本上不排斥。 移植的胚胎能保留供、受体双亲的特性吗? 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系，但遗传特性不受受体的影响。 如：1)加速育种工作和品种改良 2)大量节省购买种畜的费用 3)一胎多产 4)保存品种资源和濒危物种 胚胎分割 1.概念: 胚胎分割的基本过程 胚胎干细胞 1、胚胎干细胞的培养 干细胞的分类： 按分化潜能分： (1)全能干细胞：具有形成完整个体的分化潜能。 (2)多能干细胞：具有分化出多种细胞组织的潜能，失去发育成完整个体的能力。 (3)单能干细胞：只能向一种类型或密切相关的两种类型分化的细胞。 按来源分： (1)胚胎干细胞：当受精卵分裂发育成囊胚时，内细胞团的细胞即为胚胎干细胞。 (2)成体干细胞：指已分化特定组织中的未分化细胞， 胚胎干细胞的应用前景 * 1978年7月25日，世界上第一个试管婴儿路易斯· 布朗在英国出生。她是由Steptoe和Edwards利用体外受精和胚胎移植技术，由代孕母亲生出的第一个试管婴儿。 据官方统计，英国1985～1995年间，诞生“试管婴儿”达2.2万名，成为治疗不育不孕症的重要手段之一。 2、研究的重要内容(技术手段)： 1、概念： 通常指对高等脊椎动物，特别是哺乳动物的受精卵或早期胚胎，进行的各种操作技术。 试管动物 胚胎干细胞培养 胚胎干细胞核移植 第二节、胚胎工程 一、体外受精和胚胎体外培养 (一)体外受精 1、概念： 采集雌性动物成熟的卵细胞和雄性动物的精子，使其在试管中受精。 2、过程： （1）精子的收集和获能； （2）卵母细胞的收集和培养； （3）获能精子和卵细胞的受精； 3、过程： 形成受精卵 精子的收集和获能 1)收集精子 刚排出的精子虽有运动能力，但不能穿过卵子的放射冠和透明带，只有接受雌性生殖道的分泌物（获能因子），才能获得受精的能力，这种作用称为精子获能。 2)获能处理 人工条件下一般是利用人工配制的培养液（获能液）进行精子培养，为精子提供必要的理化条件，使其获能。 精子在雌性生殖道内的停留，引起精子发生生理生化改变，从而获得受精的能力。 卵母细胞的收集和培养 卵母细胞的采集：卵巢经过( )处理，具体做法是给供体注射( )，使母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后使用( )确定卵泡位置，插入( )取卵泡液（连同未成熟的卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。 超数排卵 促性腺激素 超声监视器 穿刺针 从屠宰厂收集牛卵巢 取出卵母细胞 活体进行穿刺取卵 在专用的受精溶液中完成受精过程。 获能精子和卵细胞的受精 胚胎体外培养的培养液有什么要求？ 应用人工创造的环境，对获取的早期胚胎进行体外培养。 培养液：（不同时期成分不同） 培养液: 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。 其他条件：适宜的温度等。 (二)胚胎体外培养 【特别提醒】“试管动物”并不是从试管中呱呱坠地的，由于没有任何一个科学家可以在实验室中模拟哺乳动物的子宫条件，所以，哺乳动物培育到早期胚胎（一般是囊胚期之前），必须移植到代孕母体的子宫中去，最后产出试管动物。 不同动物胚胎移植时间不同 桑椹胚阶段：牛、羊 8或16细胞胚阶段：小鼠、家兔 4细胞胚阶段：试管婴儿 选择 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种 取出早期胚胎 质量检查、培养 胚胎移植 妊娠检查 分娩（胚胎移植的犊牛） 牛胚胎移植过程 良种雌性动物 一般品种的雌性动物 供体：提供胚胎的个体。 受体：接受胚胎的个体。 促性腺激素 同期发情技术：主要是借助激素剌激卵巢，使其按照预定的要求发生变化，使处理母畜的卵巢生理机能都处于相同阶段，从而达到同期发情。 1、概念： 将经济价值较高、遗传性状优秀的母畜，经过激素处理，使其超数排卵后受精。再将发育的（ ）移植到同期发情的（ ）的子宫内，通过代孕母妊娠产仔的技术。 因此胚胎移植也被称做“（ ）” 早期胚胎 代孕母畜 借腹怀胎 二、胚胎移植 可充分发挥优秀个体的繁殖潜能 缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后代数量 3、胚胎移植的意义 培养 从卵巢中获得未成熟的卵母细胞 培养 成熟的卵细胞 共同培养 体外受精 常用方法：卵巢经超数排卵