试验4酚磺肽药代动力学参数的测定.ppt

药物与机体的相互作用酚磺酞药代动力学参数的测定 机能实验学 内 容 实验目的 1 实验步骤 2 注意事项 3 实验结果 4 讨论 5 实验目的 掌握药代动力学参数测定方法。 实验步骤 取健康家兔1只，称重，用25%乌拉坦（3.5 mL/kg）耳缘静脉注射麻醉，将动物仰卧固定于兔台上。 1 剪开颈部皮肤，暴露并钝性分离颈浅静脉，下缘穿线，向远心端插入充满肝素的静脉插管，结扎固定，从静脉插管取给药前的空白血1 mL。 2 耳缘静脉注射0.6% PSP溶液，按0.4 mL/kg给药，注射后5、10、15、25 min分别从静脉插管取血1 mL放置于备好的试管内，血液离心（2500 r/min）5 min，分离血浆。 3 用移液枪吸取血浆及标准液0.1 mL，加入稀释液1.9 mL摇匀（表8-9），于560 nm处比色，记录其光密度OD值（以稀释液为调零管）。 4 家兔耳缘静脉注射（麻醉及给药时） 剪去耳缘部位的被毛，用乙醇擦拭或用手指轻弹，耳缘静脉即清晰可见。 注射完毕抽出针头，用棉球压迫注射部位数分钟，以免出血。 实验步骤 Table 8-9 The preparation method of test tube 注意事项 取血结束后，静脉插管内注入少量（约0.1 mL）0.2%肝素，以免凝血。放血时静脉插管内的肝素与血同时放入试管，肝素起抗凝作用。 1 防止溶血，取血时间尽量准确。 2 平衡离心管，防止污损离心机。 3 当一侧颈浅静脉取血失败时，可取另一侧颈浅静脉或耳中央动脉。 4 实验结果 计算血药浓度 由于PSP的分子量为354，PSP标准溶液的浓度为40 μmol/L，所以 1 计算药代动力学参数 2.1 将计算所得5、10、15、25 min的血浆药物浓度与相应的取血时间做药时曲线，用梯形法计算曲线下面积AUC。 2.2 将上述血浆药物浓度取对数值lgCt，以lgCt-t用excel软件进行直线回归，求出a、b、r值。 2.3 计算药代动力学参数（并注明各个参数的单位）。消除速率常数K，血浆半衰期t1/2，表观分布容积Vd，总清除率Cl。 2 实验结果 time 5min 10min 15min 25min OD Ct（mg/L） LogCt C 5 min 10 min 15 min 25 min C0 t 实验结果 【附】参数计算公式 讨 论 测定血药浓度时，为什么用血浆而不用血清？ 1 2 一级动力学消除和零级动力学消除的主要特征各是什么？ 实验4，酚磺酞药代动力学参数的测定。 * 下面先介绍一下本实验所涉及到的内容，包括：实验目的、实验步骤、实验中的注意事项、实验结果和讨论 * 首先是实验目的，通过本实验，可以掌握药物的药代动力学参数的测定方法。 * 接下来介绍实验步骤。在实验整个过程中，按照以下几个步骤进行。首先，取健康家兔1只，称重，用25%乌拉坦按照3.5 ml/kg耳缘静脉注射麻醉，将麻醉好的动物仰卧固定于兔台上；然后，剪开家兔颈部皮肤，暴露并钝性分离颈浅静脉，并且下缘穿线，向远心端插入充满肝素的静脉插管，结扎固定，从静脉插管中取给药前的空白血1 ml；接下来，耳缘静脉注射0.6% PSP溶液，按0.4 ml/kg给药，注射后5、10、15、25 min分别从静脉插管取血1 ml放置于备好的试管内，取样结束后，血液离心（2500 r/min）5 min，分离血浆；然后进行测定，具体方法如下，用移液枪吸取血浆及标准液各0.1 ml，加入稀释液1.9 ml摇匀，于560 nm处比色，记录其光密度OD值（以稀释液为调零管） * 在实验过程中，给家兔麻醉以及给药时，需要耳缘静脉注射，具体操作过程中有以下几点需要注意：（1）剪去耳缘部位的被毛，用乙醇擦拭或用手指轻弹，耳缘静脉即清晰可见；（2）注射完毕抽出针头，用棉球压迫注射部位数分钟，以免出血；（3）在药液推注过程中，感觉比较顺畅，否则针尖可能不在血管中。 图8-9，则是以表格的形式表示，在测定血浆中药物浓度时，测定管中各自的加样量。即样品管以及标准品管，各自加样0.1ml，然后同时加入1.9ml的稀释液，混匀后测定OD值。 * 最后，在整个实验过程中，另外要注意以下几个方面：1：取血结束后，静脉插管内注入少量（约0.1 ml）0.2%肝素，以免凝血。放血时静脉插管内的肝素与血同时放入试管，肝素起抗凝作用；2：防止溶血，取血时间尽量准确；3：当一侧颈浅静脉取血失败时，可取另一侧颈浅静脉或耳中央动脉；4：平衡离心管，防止污损离心机。 * 实验结束后，计算实验结果。实验结果包括两部分。首先计算各个时间点的血药浓度，按 “1”中所示公式计算得到；然后计算药代动力学参数，其中包括（1）将计算所得5、10、15、25 min的血浆药物浓度与相应的取血时