肽链合成的起始.ppt

证明mRNA 是翻译的模板 真核细胞mRNA的结构特点 密码子与反密码子的配对关系 氨基酸的活化 N-甲酰甲硫氨酰-tRNAifMet的形成 氨酰- tRNA合成酶特点 9.3.2 原核生物多肽链的合成过程 1. 翻译的起始 2. 翻译的延伸 Tu\Ts循环 3. 翻译的终止 9.3.3 真核生物多肽链的合成 信号肽(signal peptide): (1)在真核生物未成熟分泌性蛋白质中,可被 细胞转运系统识别的特征性氨基酸序列, 约15-30 AA(含疏水AA较多)。 (2)作用：把合成的蛋白质移向粗面内质网膜 与粗面内质网膜结合，把合成的蛋白质送入粗面内质网膜 (3)信号肽对靶向输送有决定作用。 9.4 蛋白质的运输 9.4.1 信号肽引导蛋白质运输 游离核糖体：线粒体及叶绿体膜蛋白质 粗面内质网核糖体：溶酶体蛋白、分泌至胞外蛋白、质膜骨架蛋白 信号肽序列 核糖体有3个tRNA结合位点 A位点 P位点 E位点 核糖体A位点（aminoacyl site，简称“A位”），也称“受位”，是核糖体内接受新氨酰-tRNA的位点，主要部分位于大亚基中。在A位处5S rRNA有一段序列能与氨酰-tRNA的TψC环的保守序列互补，便于新氨酰-tRNA移入A位。起始用的tRNA没有该段序列，故它只能直接进入核糖体P位。 核糖体P位点（peptidyl-tRNA site，简称“P位”），也称“供位”，是核糖体内前一个tRNA将其肽基或甲酰甲硫氨酰基转移至后一个tRNA上的位点。该位点在大亚基中的区域含有肽酰转移酶。 核糖体E位点（exit site，简称“E位”），是去氨酰-tRNA即空载tRNA离开的核糖体的位点。 核糖体的几个位点(Lewin B., 2000) 9.3 翻译的过程 9.3.1 氨基酸的活化 氨基酸 ATP + 氨酰腺苷酸 E-AMP PPi 第一步 AMP 第二步 E 3-氨酰-tRNA 3’-CCA-OH CHO-HN-CH-COO-tRNA CH2 CH2 S CH3 +H2N-CH-COO-tRNA CH2 CH2 S CH3 Met-tRNAiMet fMet-tRNAifMet N10-CHO-FH4 FH4 转甲酰酶 a、专一性： ?对氨基酸有极高的专一性，每种氨基酸都有专一的酶，只作用于L-氨基酸，不作用于D-氨基酸。 ?对tRNA 具有极高专一性。 b、校对作用：氨酰- tRNA合成酶的水解 活性可以水解错误活化的氨基酸。 原核生物多肽链的合成分为三个阶段：肽链合成的起始、肽链的延伸、肽链合成的终止和释放。 1、翻译的起始 2、翻译的延伸 3、翻译的终止及肽链释放 蛋白质合成的辅助因子 1.起始因子（IF） IF1 IF2 IF3 2.延长因子（EF） EF-Tu EF-Ts EF-G 3.终止因子（RF） RF1 识别UAA UAG RF2 识别UAA UGA RF3 不识别，但是能激活前2个因子 Initiation of protein synthesis in bacteria 30S 小亚基 模板mRNA fMet-tRNAfmet IF-1, IF2, IF3 GTP 50S 大亚基 Mg2+ 30S亚基? mRNA IF3- IF1复合物 30S? mRNA ? GTP- fMet –tRNA- IF2- IF1复合物 70S起始复合物 codon anticodon A位 P位 mRNA +30S亚基-IF3 IF2-GTP-fMet-tRNA IF3 50S亚基 IF2+ IF1+GDP+Pi IF1 70S起始复合物 1 2 1 2 2 3 2 3 进位 转肽 (肽键形成) 移位 进位 (Tu\Ts) GTP GTP N-端 2 3 5′ 3′ C-端 转肽 1 5′ 3′ （EF-G） Ts Ts-GDP Tu: 氨酰-tRNA结合因子 四元复合物 进位 真核EF-1 Source: 转肽：肽酰基转移酶 Source: 移位：移位因子EF-G, EF-2 （1）释放因子RF1或RF2进入核糖体A位。 （2）多肽链的释放使肽酰基转移酶活性变为水解酶活性 （3）70S核糖体解离 5? 3