植物组织培养的过程.ppt

小思考：微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大量无机营养，包括植物生长必需的大量元素和微量元素。 小讨论：相同点：培养基配制方法，无菌技术及接种操作等基本相同。 不同点：花药培养的选材非常重要，需要先选择时期适宜的花蕾，花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基，花药培养对培养基配方的要求更为严格。 (一)植物组织培养的过程 1．菊花组织培养过程 2．月季的花药培养 (二)影响植物组织培养的因素及成功的关键 1．影响因素 (1)内部因素：材料的选取。 (2)外部因素：营养成分的种类及配比；植物激素的用量及使用顺序；pH、温度、光照等。 2．获得成功的关键 (1)植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差，对培养条件要求较高。 (2)培养材料一旦被微生物污染，就会导致实验失败。原因是微生物增殖快，生长迅速，消耗养分多，并产生代谢废物毒害培养材料。 (3)无菌技术主要包括对操作空间、实验用具、实验材料以及操作者的消毒灭菌。 一旦发现培养物被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸气锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理。 (三)植物激素在组织培养过程中的重要作用 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为： 1．在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 2．使用顺序不同，结果不同，具体如下： 3.用量比例不同，结果也不同： (四)实验操作中应注意的几个问题 1．材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。 2．外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。 3．培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照，而在后期需光照。 【例】　某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离，为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植物的一部分器官组织进行离体培养，发育成完整的植株。进行离体培养时不应采用该植株的 (　　) A．茎尖　　　　　　　　 B．子房壁 C．叶片 D．花粉粒 解析：繁殖名贵花卉是为了保留亲本的性状，应通过无性繁殖，利用植物细胞的全能性，不能改变其遗传物质。而花粉粒已经过减数分裂，遗传物质是该植物体细胞的一半，所以培养该植株不能用花粉粒。 答案：D ?变式：植物学家将胡萝卜的韧皮部的细胞分离出来，将单个细胞放入特定的培养基中培养，获得了许多完整的植株，此过程依据的原理和技术分别是(　　) A．细胞分裂和细胞工程 B．细胞的分化和基因工程 C．细胞的全能性和植物组织培养 D．花药离体培养和单倍体育种 解析：体细胞含有该物种的全套遗传信息，具有发育成一个生物体的潜能，这叫细胞的全能性，植物离体细胞培养成植物体的技术叫植物组织培养技术。 答案：C 1．(2010届济宁期末)乙醇等“绿色能源”的开发备受关注。利用玉米秸秆等生产燃料酒精已成为大势所趋。 (1)植物组织培养可实现玉米等的大规模快速繁殖，图解如下，由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植株，这项技术利用了________原理，通过组织培养技术进行植物繁育，可以很好地保持亲本的优良性状，原因是_____________ A、B分别代表________和________，过程①、②分别表示________和________。 (2)在玉米组织培养过程中，有关说法不正确的是 (　　) A．培育出的玉米植株个体都是纯合子 B．A细胞全能性最高 C．从外植体到A的过程不需要光照 D．从外植体到完整植株，细胞分裂都是有丝分裂 (3)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下： 步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。 步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意________和________，加琼脂后灭菌，制成固体平板。 步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。 步骤4：根据________筛选出突变菌。 (4)上述步骤2、3和4的依据分别是__________________。 (5)突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物和DNA聚合酶的作用分别是什么？ 解析：本题是一道综合题，考查植物组织培养技术、微生物的筛选技术及PCR技术。 (1)(2)植物组织培养技术图示，其原理是植物细胞的全能性，由于整个过程均为有丝分裂，故亲子代遗传物质相同，从而保持亲本的优良性状。培养过程为 脱分化过程没有叶绿