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* * * * * * * * * * * 碱基大多为A，两侧为若干个嘧啶核苷酸 ? 两侧为富含G·C的序列 * * * * * * * * * * * * * * 剪接方式 方式一：自我剪接（内含子Ⅰ 、Ⅱ ） 形成特定的二级结构， RNA具有催化剪接的能力； 方式二：由剪接装置完成（核mRNA内含子 III） 可供识别的特异序列， 剪接装置由多种蛋白质和核蛋白组成； 方式三：需要蛋白质酶参与的剪接（酵母tRNA IV） 前两种剪接都属于转酯反应。 Ⅱ类内含子的剪接 结构特点 (1) 边界序列 5’ GU-AG； (2) 二级结构： a. 有6个茎环二级结构， b. 分支点序列： 内含子的3’端，即第6 区有一 6-12nt保守序列，哺乳动物中为PyPuPyPyT A Py。含有不配对A残基，其2-OH进行转酯 反应。 剪接机制 1）自我剪接 2）反应需要：一价和二价离子 不需能量的供给 3）具体的剪接过程 第一步：分枝点A发生转酯反应 A的2’-OH对5’剪接点发动进攻，产生套索结构； 第二步：切下外显子1，其3’-OH进攻内含子3’端的边界序列，然后释放出套索状的内含子。 Ⅱ类内含子的自我剪接 核mRNA内含子的剪接 特点： a. 剪切过程和Ⅱ类内含子十分相似， b. 本身不能形成二级结构，依赖于剪接装置进行剪接 剪接装置： 1）核蛋白：snRNPs （U1，U2，U5、U4、U6）； 由snRNA和蛋白质组成 scRNA： scRNPs 2）剪接因子：大量的蛋白，如U2AF。 作用：直接参与剪接，提供特定的结构； 剪接体 snRNP和hnRNA结合成为剪接体 U1，U2，U4，U5，U6 剪接接口——内含子5’-末端的GU和3’-末端AG，其规律称为GU-AG法则(GU-AG rule)。 剪接体(splicesome)——由snRNP和hnRNA结合形成的复合体，其功能：致内含子形成套索，并使上下游外显子靠近。 mRNA内含子剪接机制 ——除去hnRNA中的内含子，将外显子连接。 √第一次转酯——左外显子、内含子剪切套索 √第二次转酯——外显子连接、套索内内含子释放 √剪接体解体与套索降解同步 RNA splicing video 5’-端帽子结构的生成：m7GpppN— 帽子结构的种类 帽子0 (Cap-0) m7GpppXpYp m7G 7-甲基鸟苷三磷酸 帽子1 (Cap-1) 帽子2 (Cap-2) m7GpppXmpYp 第一个核苷酸的2’-O位上产生甲基化 (A N6位甲基化) m7GpppXmpYmp 第二个核苷酸的2’-O位上产生甲基化 (A、G、C、U) 帽子结构中的甲基供体为S-腺苷甲硫氨酸(SAM) 帽子结构的生物学功能 使mRNA免受核酸酶的降解，增加mRNA的稳定性； 有助于mRNA越过核膜，进入细胞质； 被蛋白质起始因子识别，使mRNA能与核糖体小亚基结合并开始合成蛋白质。 3’端加多聚腺苷酸尾 poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。 一般真核生物在胞浆内出现的mRNA，其poly A长度为100至200个核苷酸之间，也有少数例外。 二) 3端“加尾”:多聚腺苷酸 (PolyA) AAUAAA： ☆ 精确切割 ☆ 加Poly(A) 特点： 先于剪接加工; PolyA polymerase催化，转录后修饰点序列(AAUAAA)提供信号; 一般长度为100-200个腺苷酸。 poly(A)加尾信号 新合成的mRNA的3’端含两个明显的加尾信号。第一个加尾信号位于poly(A)上游，一致顺序为5’—AAUAAA—3’；第二个加尾信号位于5’—AAUAAA—3’顺序下游约15-24nt位置，有一段富含GU序列，紧随其后通常有一串U的序列。 5’—AAUAAA—15~24bp—GUGUGUUGGAAUUUUUUGUGU—3’ 如果改变5’—AAUAAA—3’位置，加尾位点改变；缺失，则不发生加尾。 富GU序列和紧随其后的富U序列对正常的加尾缺一不可 poly(A)的生物学功能 提高mRNA在胞质中的稳定性； 协助mRNA从细胞核向胞质转运； 作为