微生物培养知识清单.doc

微生物的培养与应用 知识清单 班级????? 姓名????? 课题一、微生物的实验室培养 （一）培养基 1、为微生物的生长繁殖提供营养的基质叫做???? 。从物理性质上划分，主要可分为????? 与 ?????，其中的??? 培养基（成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料已经 ??处理的材料用具不与周围的物品接触。 2、消毒：用较? ? 的方法杀死物体表面的?? 微生物，不能杀死?? 、?? 。 芽孢：细菌（芽孢杆菌、梭状芽孢杆菌、少数球菌）形成的 逆性强的休眠体； 孢子：某些低等植物、真菌（如蘑菇、酵母菌）、放线菌产生的脱离母体的繁殖体 消毒方法：(1)煮沸消毒法 100℃煮沸5～6min （2）巴氏消毒法 高温短时处理，常用来消毒奶制品，①70-75℃，30min； ②80℃，15min；可以杀死牛奶中的微生物，并且牛奶中的? 不被破坏。（3）化学药剂消毒 操作者的双手一般用???进行消毒；饮水水源用?? ?进行消毒；（4）紫外线消毒 接种室、超净工作台、接种箱在使用前可以用 ?????照射30min，进行消毒处理。为了加强消毒效果，在照射前，适量喷洒?? ??或?? ??等消毒液。 3、灭菌：用?? ?的理化因素杀死物体内外的所有微生物，包括?? ?和?? ?。 　方法：(1)灼烧灭菌 将需要灭菌的物体通过酒精灯火焰的?? ?（? ?）灼烧。接种环、涂布器、接种针、试管口等应该用??? 灭菌；（2）干热灭菌：将灭菌物品放入干热灭菌箱，在160~170℃加热1~2h灭菌的方法。玻璃器皿(吸管、培养皿、玻棒、烧瓶、试管、滴管)、金属用具等器材一般用? ???法进行灭菌，所用器械是?? ；(3)高压蒸汽灭菌 将物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内的? ???，目的是有利于锅内温度升高；随后关闭排气阀继续加热，气压升至? ???，温度为? ???，并维持15～30min；切断热源使温度自然降温，气压务必降至零时打开锅盖，其目的是防止容器中的液体暴沸。培养基、无菌水等一般用?? ??法进行灭菌，所用器械是?? ? ?。 不论是消毒还是灭菌，其主要的原理都是在理化因素的作用下使微生物?????? 变性或者????? 破坏损伤，以杀灭微生物。 （三）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1、固体培养基的制备一般包括计算、称量、??? 、??? 、??? 、????。（1）计算：根据配方比例，计算配制一定量的培养基所需各种成分的用量。　　 （2）称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是 。牛肉膏通常放在称量纸上称量，溶化后再将称量纸取出。 （3）溶化：①加水加热熔化牛肉膏； ②加入蛋白胨和氯化钠继续加热； ③加入琼脂；④用 定容到100mL。整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止????? ?。 （4）调pH：用1mol/LNaOH溶液调节pH至偏碱性。 （5）灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用?? ??灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用???? 灭菌。 （6）倒平板：待培养基冷却至?? 左右时在????? 附近操作进行。 其过程是： ①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞； ②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过 ； ③左手将培养皿打开??? ?，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。 ④待平板冷却凝固后，将平板????放置。 注意：①.锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是??????????。 ②.倒平板的目的是??????????。 ③.若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？ ????????????????????。 ④.配制斜面培养基中，试管要加塞棉塞的目的是??????????。 ⑤.试管培养基形成斜面的作用是??????????。 （四）纯化大肠杆菌 1、接种方法：微生物的接种最常用的方法是?????? 、?????? ，其中???????除了可 以用于微生物的分离、纯化外，还可以用于菌落的计数。除此之外还包括????? 、????? 等方法。虽然方法各不相同，核心都是要????? ，保证培养物的?????? 。 2、平板划线法：平板划线法是通过????在琼脂固体培养