免疫纳米金催化氯金酸-盐酸羟胺光度法检测免疫球蛋白G.pdf

第28卷，第12期 光谱学与光谱分析 200 and December，2008 8年12月 Spectra／Analysis Spectroscopy 免疫纳米金催化氯金酸-盐酸羟胺光度法检测免疫球蛋白G 邓俊耀1’2，张声森1，蒋治良h3+ 1．广西师范大学环境与资源学院，广西桂林541004 2．桂林市妇幼保健院，广西桂林541001 3．桂林工学院材料与化学工程系，广西桂林541004 摘要在pH2．27的柠檬酸钠一盐酸缓冲溶液中，纳米金对氯金酸一盐酸羟胺生成较大粒径金颗粒这一慢 000 反应具有较强的催化作用。较大粒径金颗粒在600～1nln处有一个较宽的吸收峰。将纳米金标记羊抗人 IgG获得免疫纳米金，免疫纳米金也具有相同催化效果。在一定条件下，金标记羊抗人IgG与IRG发生特异 000 性结合生成纳米金免疫复合物。以16 rpm速度离心分离获得未反应的纳米金标抗上层溶液。以它作为 催化剂催化氯金酸一盐酸羟胺微粒反应，700nm处的吸光度A瑚。线性降低。其降低值△A彻。与IgG在0．1 ～10 rig·n1L～。本法具有灵敏、快速和较高的特异性， llg·mLll范围内呈良好线性关系，检出限为0．06 用于定量分析人血清IgG，结果满意。 关键词免疫球蛋白G；免疫纳米金；纳米金催化；光度法 文献标识码：A 中图分类号：()657．3 DOI：10．3964／j．issm1000-0593(2008)12—2935—04 缓冲溶液；聚乙二醇6000(华美生物工程公司)；100嵋· 引 言 mL-1胶体金(5，i0，15 胶体金标记技术因具有简单、快速、无污染等特点，在 西陇化工厂)；pH为1．67～3．69柠檬酸钠一盐酸缓冲溶液， 1．5mol·L-1 免疫检测中应用广泛[1．3]。近年来，以标记后的免疫纳米金 NHs·Hzo。金纳米粒子制备采用柠檬酸三钠 作品种来放大检测信号取得了很好的结果[4。121。免疫球蛋白 法。羊抗人IgG的金标记：用0．10mol·L叫l(2C03溶液、 G是一种常见的抗原，它的分析方法已有报道[1¨引。但未见 0．10mol·L-1 mL胶体金溶 HCI和精密pH值试纸将100 mL 采用简便易推广的光度法傲检测技术[17J81，将免疫纳米金一液的pH值调到6．5。在磁力搅拌器缓慢搅拌下，将4．5 氯金酸-盐酸羟胺催化反应与金标记免疫反应结合测定痕量 羊抗人IgG(1：25)滴加到胶体金溶液中，控制时间为5 mL min，然后加入1．67 IgG的工作发表。本文建立了一个测定超痕量IgG的高选择 min后放置4℃保存。纳米金 性的免疫纳米金催化分光光度新方法。 终浓度约为0．05％)，搅拌15