2013.3.7如何做好卡式配血幻灯片.ppt

如何做好卡式配血 深圳市人民医院输血科 陈才生 说到交叉配血试验，过去是单一的盐水配血法，只能检测血清中的完全抗体；后来是抗人球、酶法，过渡到聚凝胺配血法，可检测血清中含量较多的不完全抗体；到现在的抗人球蛋白卡式配血法，能检测血清中微量的不完全抗体。卡式配血法是输血技术的一大进步。 实行卡式配血法，在深圳输血界并无先例，科主任赵祥胜发扬他一贯的敢于开拓的精神，带领全科员工大胆探索，反复试验，不断改进，终于使该项技术走向成熟。现以主侧配血为例，总结经验如下，相信将会对如何才能做好卡式配血有所启迪。 一、要做好卡式配血试验，首先要弄清楚卡式配血的原理。微柱凝胶中含有一定量的抗人球蛋白，当把病人的血清及献血员的血球按一定比例加入其中混合，如病人血清中有不完全抗体，经37℃孵育后，不完全抗体就会致敏在献血员的血球上，再经微柱中的抗人球蛋白搭桥，献血员的血球便发生凝集形成大的凝集颗粒甚至块状，这些颗粒或凝块在离心时无法通过微柱凝胶筛为阳性结果，根据微柱上面的凝块或微柱中凝集颗粒的多少、散布的程度，来判定阳性的强弱。而不凝集的血球会完全地沉到微柱底部为阴性结果。 二、对献血员血样的要求。要知道卡式配血对献血员血样的要求如何,我们先来做以下的试验：直接把血袋上的配血辫子剪开放入试管中,从试管中直接吸取10微升献血员的血球及40微升病人的血清加入微柱中，孵育10分钟，用配套的离心机离心后，你会发现大部分微柱中散落着很多象细沙样的红色颗粒，使结果难以判定。经过反复对照试验得知，原来导致这种现象的原因是献血员的血球没有处理好，是血站在采血时血没有与抗凝剂接触，血液尚未抗凝，血液中存在凝集颗粒，这种颗粒难以通过微柱而出现假阳性。 出现假阳性的配血结果是我们在做卡血配血试验的初期经常遇到的，后来我们采取白细胞过滤后的血液（即在过滤袋上热合辫子）作为卡式配血标本，再也没有发现过假阳性。由此得出经验之一：做卡式配血试验，献血员的标本必须是充分抗凝的或充分洗涤的，最好是白细胞过滤后的血用生理盐水配成5%的红悬液。 三、对病人配血标本的要求。卡式配血的起初阶段，我们并不强调病人配血标本用抗凝血，结果出现很多拖尾现象，就是离心后微柱的上半部有一条很粗的红线或放射状的红色颗粒。特别是用刚抽来不久的配血标本配血,红线更为严重。为什么呢？我们做了深入的研究得知，原来是由于血清中含有少量的纤维蛋白丝，特别是未充分凝固的血液，血清中含有较多的纤维蛋白，形成纤维蛋白网将部分血球网住而不能随离心力下沉，因而造成拖尾现象。 针对这一情况，我科所有配血标本均采用了抗凝血。但是值得注意的是，如果你不把标本离心，抗凝标本配血也会出现拖尾现象，因为自然沉淀分离出的血浆无论静置多长时间都含有相当一部分的纤维蛋白丝。由此得出经验之二:病人的配血标本最好是抗凝血，而且配血前必须离心，如果是非抗凝血最好是把标本放在37℃水浴箱中一段时间再离心，要将纤维蛋白除去，吸取无纤维丝的血清或血浆配血，才能防止微柱拖尾现象。 四、不能随意缩短孵育时间。卡式配血孵育时间较长，能否缩短呢？请看以下实验，我们收集了12例不规则抗体阳性的配血标本（其中有5例为新生儿溶血病游离试验阳性的标本）进行孵育前后对照试验，结果有8例孵育前为阴性，只有4例强阳性的新生儿溶血病患儿为阳性，而经孵育后阴性的8例又转为阳性。 由此得出经验之三：卡式配血必须孵育，并且满足规定的时间，否则会漏检不完全抗体，导致假阴性而发生非溶血性的输血反应。 五、要使用与配血卡配套的离心机。由于戴安娜离心机规定离心时间为10分钟，我们试图把戴安娜配血卡用博唯优的离心机（规定时间为5分钟）离心,以达到缩短离心时间的目的，结果有相当部分的血球不能沉到微柱的底部，就算再增加5分钟的离心时间也无法完全地将血球沉到微柱底部。由此得出经验之四：卡式配血必须使用其配套的离心机，否则会由于离心时间及其转速的差异而影响配血结果。 六、新生儿及一些反定型凝集较弱的病人做卡式配血试验要特别注意血型的准确无误。众所周知,交叉配血是安全输血的主要关卡,然而,新生儿交叉配血(包括血清中含完全抗体效价较低的成年人)往往难以把好此关,为什呢?我们的发现说明了这一点,有一次，儿科医生将某新生儿A型误写成B型，我们一边配血，一边复查血型，发现了该血型错误，但已经用B型血进行交配，等到配血结果出来， 我们惊奇地发现配血结果通过了，后来我们用了5个B型的献血员和该A型的新生儿进行交配，结果都通过了，因此，我们对该新生儿进行血型反定型检测，结果是与A、B血球均无凝集，未能反映真实的血型。受此启发，我们用24例新生儿血清进行相反血型的交叉配血试验（即A、B型新生儿的血清用B、A型的血球交配），结果有4例通过，通过率占