《中国药典》微生物检查法幻灯片.ppt

* 怎么验证 （3）验证尽可能做到标准化操作，使操作简便、结果重现性好。 菌液制备及放置时间 常规法和培养基稀释法操作注意事项 薄膜过滤法操作注意事项 * 验证以后怎么办？ 无菌检查：进行供试品无菌检查时，所采用的检查方法和检验条件应与验证的方法相同。 微生物限度：检查时，按已验证的计数方法进行供试品的细菌、霉菌酵母菌菌数的测定；供试品的控制菌检查应按已验证的方法进行，增菌培养基的实际用量同控制菌检查方法的验证。 检验方法的各论化！ * 方法验证实验工作的完善和发展 一方面以验证实验为手段和契机，充分完善和细化我国无菌和微生物限度检查方法，建立起完备的SOP体系。 另一方面集中力量尽快完成我国数以千计的品种的检验方法的初步验证实验，并收集、整理、分析已有验证资料，指出各品种验证实验的发展方向。 通过方法验证促进我国药品微生物检验工作全面发展。 * 五、微生物限度检查面临的问题 * 1、技术现状与标准化 1）培养基 培养基质量标准。 固体培养基的灵敏度、专属性 * 玫瑰红钠琼脂培养基的专属性 当染菌较多时，玫瑰红钠琼脂培养基生长大量的细菌，给结果判断带来困难。 * 玫瑰红钠琼脂培养基的专属性 以中检所玫瑰红钠琼脂培养基（批号：050428 ）与营养琼脂培养基（批号：050523 ）比较，加入50～100cfu阳性菌在相同条件培养观察，见下表9： 　 大肠 铜绿 金葡 枯草 营养琼脂培养基35℃培养48hrs 75 81 91 79 玫瑰红钠琼脂培养基35℃培养48hrs 57 47 0 0 玫瑰红钠琼脂培养基25℃培养72hrs 45 41 0 0 玫瑰红钠琼脂培养基专属性实验结果 * 1、技术现状与标准化 2）、自动化程度低，仍然依赖大量的人工 以方法验证为基础，引入更为便捷的供试品前处理技术，规范供试品前处理 有条件的地方可以考虑引入自动稀释、自动接种、仪器判读结果等设备和技术 3）、75mm薄膜过滤器的研制 征对我国中成药品种多、情况复杂,已开发研制的75mm薄膜过滤器在目前的验证工作中发挥了重要作用。 * 3、微生物限度检查的几个问题 原料药的微生物标准问题； 药材原粉的界定问题； 含豆豉、神曲等发酵成分的中成药制剂标准问题； 纯化水微生物限度检查问题； * 原料药的微生物标准问题 原料药是药品生产过程中引入微生物污染的重要来源之一，虽然一些药品在生产过程或终产品阶段可以采取一些灭菌措施杀灭污染微生物，但可能因为由此引入的死菌体、毒素等无法消除而危害患者，而原料药过高的微生物荷载可能直接挑战一些灭菌措施的有效性，造成灭菌失败，使药品存在更大的安全隐患。所以世界各国药典均规定应对原料药进行微生物检查，以消除或控制其对药品引入的微生物污染。 在严格执行药品GMP的前提下，国外药典更为重视原料药的微生物检查，尤其是对一些非灭菌制剂，甚至仅仅对原料药有微生物限度控制要求，而对制剂没有强制要求。中国药典2005版参考了国外药典的这一发展趋势，对于化学药品的片剂、胶囊剂、颗粒剂等6个主要口服制剂在各论和制剂通则中均未做微生物限度检查的强制要求，仅在附录中做出通用性要求，但很多企业不清楚这一变化的背景和两个必要前提，即严格的原料药微生物控制和严格的GMP管理，从而放松了对这些产品的微生物控制，可能会存在潜在风险。 中国药典规定，对药品原辅料药的微生物检查参照相应用途的药品进行，即用于非灭菌制剂生产的原料药应按相应制剂的微生物限度标准进行微生物限度控制；而用于灭菌制剂的原料药一般应符合无菌要求。考虑到生产过程中污染微生物可能发生的变化，国外企业通常在生产上自觉执行比制剂要求更为严格的原料药微生物。 * 原料药的微生物标准问题 （1）重视不够 目前一些企业对原料药微生物控制的重要性和意义认识不够，对源头上的问题解决不好，加之GMP执行流于形式，造成了频繁的药品微生物污染事故发生。 （2）标准依据不清楚 目前中国药典绝大多数药品原辅料各论项下没有明确的微生物检查标准，而是需要根据实际用途去确定相应的控制标准。 （3）抽样不正确 原料药微生物检查的抽样除了应参照相应的抽样原则，还应强调的一点是抽样的环境要求和无菌操作要求，不当的抽样方法不仅可以使得样本对总体没有代表意义、抽取的样本被污染，甚至可因抽样而污染原料。 （4）方法不合理 对于原料药微生物检查方法验证应与药品制剂微生物检查方法验证同等重视，否则同样存在检验方法不合理、不科学，检验结果没有意义的问题。 * 药材原粉的界定问题 生药原粉；2010年版一部对动物类原药材粉作了明确规定，利于标准的正确理解和执行。具体规定如下： 含动物类原药材粉的口服中药制剂要求不得检出沙门菌。其中的动物类原药材粉是指除蜂蜜、王浆