吡格列酮配合生活干预对自发高血压大鼠eNOS蛋白及mRNA水平的影响.pdfVIP

隧盘煎墨呲蛰到酌墼金生透王亟盟自蕉商血廷盘鼠!堕Q!蛋自丛堡!盟皇盔±盟燮蛔笠!塑 ·1863· 陈海燕于雪凡孔俭王赞(吉林大学第一医院干部病房，吉林长春130021) (摘要]目的探讨PlO配合生活f预对SHR大鼠如降席及心血管保护的机制。方法 w。果用比 (SHR)，PIO+7}活于预组(P)及硝苯地平组(N)。药物添加到大鼠饮水中，牛活于预为每日减少投食齄并游泳6—15rain，实验周期为12 色法检测血清中eNOS水平．采用原位杂交及免疫组化检测心肌及丰动脉组织eNOS [关键词】 吡格列酮；乍活下预：白发性高血压大鼠；一氧化氯合酶 [中图分类号】世44．1 [文献标识码】A 原发性高血压的发展与胰岛素抵抗(IR)密切相关．纠正 后．乙醚麻醉．仰位固定于手术台t．腹主动脉取J|IL。札液标本 10 000 IR可以达到良好的降压作用和心血管保护作用”‘2’。血管内 rain内以4r／min离心5min后2h内送检，比色法测量 皮是高血压形成和发展过程中重要的靶组织，能分泌几十种血 血清中eNOS水平(试剂盒购于南京建成生物工程研究所)。 管活性物质．一氧化氮(NO)就是其中之一。NO是由内皮型一 1．五4 原位杂交和免疫组化研究 氧化氮合酶(eNOS)经多步氧化还原反应生成的．可调节血管1．2．4．1标本采集及保存乙醚麻醉后，沿正中线剪开大鼠 基础张力和血压，是最强的内源性血管舒张因子”。j。本研究 mill×3 胸腔，摘取心脏及主动脉组织，将其切成3 mill标本。 对自发高血压大鼠(SHR)应用毗格列酮(PIO)配合牛活干预， 用10％中性缓冲甲醛吲定24h后经酒精逐级脱水，浸蜡块后 采用原位杂交、免疫组化测定心肌及主动脉eNOS蛋白和mR- 作5“m连续切片．备免疫组化和原位杂交之用。 NA表达，探讨PIO配合生活方式干预的降压作用及心血管保 1．2．4．2原位杂交探针的制备和免疫组化制备 原位杂交探 护作用的机制。 针及免疫组化试剂盒购于武汉博上德牛物_[程有限公司。ATl l材料与方法 TCAGG CCCTt；TCATCT1’CTG AAACA’rrTrrc一3’；②5-CTGGC l-l实验动物SHR大鼠33只，雄性，购自北京维通利华公 TCCCT GCTrCGAGATGTTCCGAGAG TCCCA-3’；③5‘-TGAGC 司，鼠龄6—7W。体重120—160g，分为4—6只／笼饲养，室温 CTGAA-3tO 20℃～24℃，控制昼夜光照，避免过多噪声及其他干扰。观察 1．2．4．3实验方法原位杂交用标记探针技术，按说明书操 期为lW，实验期为12W。 作，二氨基联苯胺(DAB)显色。免疫组化：采用抗乍物索-生物 1．2方法 素-过氧化物酶复合物法(ABC)，按说明捂操作，DA