样品前处理技术和应用.ppt

样品前处理技术的 进展与应用 辽宁省疾控中心理化技术检测所 ;一、样品前处理的重要性;1 样品前处理内容;样品前处理;2 重要性--以农药残留分析为例;样品分析过程中各程序所花费的时间;色谱过程中的误差来源;3 国际上前处理技术发展;4 我国残留分析前处理现状;二、样品提取技术理论;1 液-液萃取(LLE);1.3 液-液萃取的类型;1.4 液-液萃取优缺点;1.5 乳化现象的防止措施;2 液-固萃取;3 柱色谱萃取;3.1 柱色谱技术分类;（2）分配色谱--利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同，以使组分分离。其中一相为液体，涂布或使之键合在固体载体上，称固定相；另一相为液体或气体，称流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。 ;（3）离子交换色谱--利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换能力不同而使组分分离。常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂，流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。 ;（4）凝胶渗透色谱--又称排阻色谱，是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同，以使组分分离。填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等。 ; 3.2 柱色谱的典型应用： （1）分离 （2）净化 （3）制备;三 样品提取净化方法及应用;1 固相萃取（SOILD PHASE EXTRACTION）;1.2 固相萃取的特点;保留 冲洗 洗脱;1.4 固相萃取过程;1.4固相萃取的过程;（2） 添加样品 将样品加于固相萃取柱中，用正压或负压（常压）使样品通过柱子。样品的流速必须控制，一般在1.5mL/min 。以离子交换为作用机理的萃取，速度要适当降低，以保证分析物有足够的时间与柱填料的离子交换官能团发生作用。;（3） 固相柱的洗涤 用适当的洗涤溶剂有选择性地将吸附力弱的杂质洗涤下来，而留分析物于柱上。 （4） 固相柱的干燥 用自然或吹氮的方法使固相柱干燥。在非水溶性有机溶剂为洗脱剂或用GC分析时，柱的干燥尤为重要。;（5）分析物的洗脱 选择适当的溶剂将分析物洗脱下来，用于分析或进一步处理。 洗脱溶剂应满足： A:必须有足够的强度，以最小用量???分析物洗脱下来； B:必须有足够的选择性，尽可能只将分析物洗脱，而将吸附力强的杂质留在柱上。;1.5 固相萃取分离模式;（1） 正相萃取;（2） 反相萃取;（3） 离子交换萃取;1.6 吸附剂选择;吸附剂选择考虑的其它因素;遵循“相似相溶”原则，并满足下列求： 1）对被测组分溶解度大； 2) 对干扰杂质的溶解度小； 3）能有效释放被测组分； 4) 具有良好地解离蛋白或脂肪的能力； 5）沸点适中（40～80℃）、黏度小、毒性低、易纯化、价格低廉、并易于进一步净化处理。 ;1.9 常见SPE柱类型;不同规格的SPE柱; 排放槽;SPE 柱;排放槽;1.10 SPE应用;应用实例;自动固相萃取仪;在线 SPE-HPLC分析;2 凝胶净化法（GPC）;GPC 的原理;2.2 凝胶色谱仪;GPC 样品净化系统-手动;GPC 样品净化系统-全自动;2.3 影响GPC分离效果因素; 固相微萃取(Solid Phase Microextraction）;3.1 固相微萃取原理;3.2 SPME特点;3.3 固相微萃取的分类;3.3 固相微萃取的分类;价指瘴约潍札蔓枫慨杉凹伪委半啸椎寨杂辖册乐赂烷容申埃郁痢译秒毛裸样品前处理技术和应用样品前处理技术和应用;3.4 固相微萃取的操作步骤;3.4 固相微萃取的操作步骤;3.5 SPME技术关键;其它影响因素： （1）液膜厚度及其性质的影响：石英纤维表面的固相液膜厚度对于分析物的固相吸附量和平衡时间都有影响。液膜越厚，固相吸附量越大，有利于提高方法灵敏度。 ; （2） 搅拌效率的影响：HS-SPME方法中分析物由液相向气相扩散仍是最慢的一步。通过搅拌，加快分析物由液相向气相扩散的速度，使顶空区分析物浓度增大，快速达到平衡。可提高分析的灵敏度。 ; （3）温度的影响： 温度升高， 扩散速度随之增大，同时升温加强了对流过程，因此升温有利于缩短平衡时间，加快分析速度。在使用SPME方法时应寻找最佳工作温度。 ;（4） 盐的作用：在气相和液相间的分配系数 K 受基体性质的影响，当基体变化时，分配系数也会改变。 在水溶液样品中加入盐（NaCl、Na2SO4等）后，水溶液的离子强度增大， K增大，使分析物在水相中溶解度减小，在气相中浓度增大。 （5） 溶液pH值的影响 控制溶液pH值能够改变