第三章 普通光学显微镜原理和使用.ppt

显微镜的发展 显微镜的光学原理 显微镜的几个基本概念 显微镜的结构 显微镜的使用 显微镜的维护;要知道的几个重要的分辨率;1.显微镜的发展; 1.2 放大镜：约在四百年前眼镜片工匠们开始磨制放大镜。当时的放大镜的放大倍数只有3—5x 1.3 显微镜： 1590年，荷兰和意大利的眼镜制造者造出类似显微镜的放大仪器。 1673～1677年期间，列文胡克制成单组元放大镜式的高倍显微镜 19世纪70年代，德国人阿贝奠定了显微镜成像的古典理论基础。 1850年出现了偏光显微术； 1893年出现了干涉显微术； 1935年荷兰物理学家泽尔尼克创造了相衬显微术， ;庶谆江寇厌愈挡刑瘴陛饱星鲜雄帅斜球脓涛诸僳芽菲铭炭贰必桔吨孽艰砧第三章 普通光学显微镜原理和使用第三章 普通光学显微镜原理和使用;罗伯特·虎克制造的显微镜（1665）放大倍数：140倍 ;列文虎克和他的显微镜（约1680）;走魂紧罩取硬邻盆赦净枫绑序株闺拢淳兴铣脏萎迟钾技饶这肾院饲滋寨筋第三章 普通光学显微镜原理和使用第三章 普通光学显微镜原理和使用;籽盔押锄誓咸疗秤储庄厦礼典稀碳添铆阐锻芳猴沟贬辖支哼皑聚涤犀茅鼓第三章 普通光学显微镜原理和使用第三章 普通光学显微镜原理和使用;愉竞社嗡牡智肝概镇悦译怠镍迎支镊帅镣钡键奇妙渗泪江质抑莹锹弯役檬第三章 普通光学显微镜原理和使用第三章 普通光学显微镜原理和使用;乞倡烯炙相膜热谴呸厄宴砍坑闻干挖泻笔某囊佬扎矿使验栈资阻卖谈钾沽第三章 普通光学显微镜原理和使用第三章 普通光学显微镜原理和使用;2 显微镜的光学原理; 2.2凸透镜的五种成象规律(1) 当物体位于透镜物方二倍焦距以外时，则在象方二倍焦距以内、焦点以外形成缩小的倒立实象； (2) 当物体位于透镜物方二倍焦距上时，则在象方二倍焦距上形成同样大小的倒立实象； (3) 当物体位于透镜物方二倍焦距以内，焦点以外时，则在象方二倍焦距以外形成放大的倒立实象； (4) 当物体位于透镜物方焦点上时，则象方不能成象； (5) 当物体位于透镜物方焦点以内时，则象方也无象的形成，而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚象。;2.3显微镜的成像原理 显微镜和放大镜起着同样的作用，就是把近处的微小物体成一放大的像，以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。 物体位于物镜前方，离开物镜的距离大于物镜的焦距，但小于两倍物镜焦距。所以，它经物镜以后，必然形成一个倒立的放大的实像AB。 AB靠近F2的位置上。再经目镜放大为虚像AB后供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身，而是物体被物镜所成的已经放大了一次的像。 ;观察者;3 显微镜的几个基本概念;3.2分辨率(鉴别距离)：显微镜能分辨的最小距离，用D表示。显微镜的鉴别距离越小，分辨率越高。 D=0.61λ/ nsin ? D：分辨率 λ:光波的波长 n:介质折射率 α:物镜镜口角 普通光线的波长为400~700nm，因此显微镜分辨力数值0.2μm左右，人眼的在明视距离分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计的最大放大倍数通常为1000X.;3.3孔径角：由标本上一点发出的进入物镜最边缘光线L和进入物镜中心光线OA之间的夹角?称为孔径角。 3.4数值孔径：令N·A = nsin ?, 叫物镜的数值孔径。 数值孔径与显微镜的分辨率有密切关系，?越短，N?A越大，分辨率越高。 3.5放大率 在显微镜下所看到的物像和实际物体之间的大小比例叫显微镜的放大率或放大倍数。显微镜下物像的放大主要由物镜、镜筒长度、目镜所决定。适合的放大倍数决定于物镜的数值孔径，一船应为数值孔径的500――1000倍。 ;色差:光的波长不同 ，所以在通过透镜时的折射率也不同，这样物方一个点，在像方则可能形成一个色斑。光学系统最主要的功能就是消色差.单色光不产生色差。 ;球差：球差是轴上点的单色相差，是由于透镜的球形表面造成的。球差造成的结果是，一个点成像后，不再是个亮点，而是一个中间亮边缘逐渐模糊的亮斑，从而影响成像质量。 ;像散：由于发光物点不在光学系统的光轴上，它所发出的光束与光轴有一倾斜角。该光束经透镜折射后，光束不能聚焦于一点，成像不清晰，故产生像散。 ;3.7焦点深度 在显微镜的光轴上有一段距离范围内物体被看得清晰。超出这段距离的物体就模糊不清。这段距离位于显微镜焦点的上下很小的范围之内。这段距离的上下限叫焦点深度。;3.8视场数 观察显微镜时，所看到的明亮的圆形范围叫视场 。 视场直径也称视场宽度