单胺氧化酶与线粒体的关系及作用.doc

4.2作业 王德美1. 与线粒体关系 单胺氧化酶存在于许多组织的细胞线粒体外膜上. 2作用. 单胺氧化酶作用于一级胺及其甲基化的二、三级胺，也作用于长链的二胺。对所谓生物胺，即酪胺、儿茶酚胺、5-羟色胺、去甲临床分析 （1）血清单胺氧化酶的活性高低能反映肝纤维化的程度，是诊断肝硬化的重要指标。肝硬化患者血清单胺氧化酶活性升高的阳性率在80%以上，最高值可超过对照参考值的两倍，而且血清单胺氧化酶活性升高与肝表面结节形成的进程相平行。 （2）各型肝炎急性期患者血清单胺氧化酶活性不增高，但暴发性重症肝炎或急性肝炎中有肝坏死时，由于线粒体破坏，血清单胺氧化酶活性可升高。单胺氧化酶活性升高还可见于甲亢、糖尿病合并脂肪肝、充血性心衰、肢端肥大症等疾病。 （3）由于生物个体血清单胺氧化酶活性易波动，应多次测定以防偏差。若单胺氧化酶活性超过80U，应将样品稀释后重新测定　肾上腺素、肾上腺素等也有作用。 3. 研究现状及与衰老关系 (1) 人体中的单胺氧化酶 人体内含有两种单胺氧化酶：单胺氧化酶A（MAO-A）和单胺氧化酶B（MAO-B）。两者都存在于神经元和星形胶质细胞中。除中枢神经系统外，MAO-A还存在于肝、胃肠道和MAO-A是消化道摄取的单胺类物质代谢中的重要酶。MAO的两种亚型都可以使单胺类神经递质失活，但两者对底物和抑制剂的专一性不同,MAO-A可通过病理途径导致头痛：5-羟色胺可被毛细血管中残留的MAO-A所分解，当它的含量较少时，血管过度舒张，而产生搏动性头痛。 人和动物的攻击行为与MAO-A基因的变种有关。[MAO-A的不同基因型也可能对人对事物的新奇感产生影响;吸烟对MAO-B有抑制作用。[MAO-B的含量随着年龄的增长而增加，因此MAO-B被认为是老化的标志，称为老化相关酶。 (2)抑制剂 1-异烟酰-2-异丙基肼（iproniazid）、β-苯基异丙基肼（pheniprazine）等药物对此酶有强烈的竞争性的阻抑作用，称为MAO抑制剂，但如果给动物，则可提高脑中去甲肾上腺素和5-羟色胺等单胺的浓度，造成行动的刺激。所以认为单胺氧化酶具有调节生物体内胺浓度的功能。单胺氧化酶抑制剂有许多药物。如治疗抑郁症的苯乙肼、异唑肼、异丙肼、苯环丙胺、吗氯贝胺、溴法罗明、尼亚拉胺、托洛沙酮、德弗罗沙酮；治疗帕金森病药司立吉兰；治疗高血压的优降宁，抗菌药物呋喃唑酮、灰黄霉素、异烟肼，抗肿瘤药物甲基苄肼，研究工具药氯吉兰，复方药物益康宁（主要由普鲁卡因、肌醇和维生素B6组成）。值得注意的是，某些中药也有单胺氧化酶抑制作用，如靛红、鹿茸、山楂、何首乌等。下列药物禁止或不宜与单胺氧化酶抑制剂合用，否则可能引起不良反应，甚至是严重的、危及生命的不良反应，如血压骤然升高，甚至导致高血压危象，心动过速，呼吸困难，运动失调，高热，精神错乱等。如： 1、抗抑郁药：丙米嗪（米帕明）、氯米帕明、阿米替林等三环类抗抑郁药，马普替林、米氮平、米安色林等四环? 类抗抑郁药，氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀、茚达品、舍曲林、西酞普兰、安非他酮等5羟色胺摄取抑制剂，苯丙胺、诺米芬新等。 2、降压药：可乐定、胍乙啶、利血平以及含利血平的复方制剂。 ? 3、中枢神经抑制药：水合氯醛、卤恶唑仑、替吡度尔、苯二氮卓类。 4、镇咳药：右美沙芬及其复方制剂。?5、平喘药：麻黄碱。 6、镇痛药：哌替啶、舒马普坦、芬太尼。 7、抗帕金森药：左旋多巴。 8、抗过敏药：苯噻啶。 9、促智药：阿米三嗪－萝巴新（都可喜）。 10、单胺氧化酶抑制剂：单胺氧化酶抑制剂之间亦不可合用。 单胺氧化酶抑制剂作用时间较长，必须在停药两周以上方可开始服用以上药物。单胺氧化酶抑制剂亦可通过抑制肝药酶系统，影响某些药物的代谢，致血药浓度升高，半衰期延长，药理活性增强。例如有报道单胺氧化酶抑制剂可延缓口服降糖药甲磺丁脲、氯磺丙脲、巴比妥类、苯妥英钠、乙醚和抗组胺药异丙嗪和苯海拉明的代谢，使这些药的药效增强。特别要提及的是，服用单胺氧化酶抑制剂期间，禁食富含单胺的食物和饮料，如奶酪、酸奶、动物肝脏、腌鱼、香肠、腊肉、蚕豆、扁豆、巧克力、酵母、腐乳、罐头无花果、菠萝、啤酒、葡萄酒、柑橘类果汁等，否则可因酪胺大量吸收造成血压急剧上升。 ? （三）器材 组织捣碎机，紫外分光光度计，恒温水浴，移液管(5ml, 0.1ml), 微量注射器（10ul）。 四、操作方法 （一）制备肌肉匀浆 称取20g 兔肉, 按W/V=1/4比例加入4℃预冷的10m mol/L Ph6.5磷酸氢二钾－磷酸二氢钾缓冲液，用组织捣碎机捣碎，每次10s，连续3次。将匀浆液倒入烧杯中，置4℃冰箱中提取过夜，过滤后得到组织提取液。 （二）LDH活力测定 试验时预先将丙酮酸溶液及NADH溶液放在25℃水浴