氨基硅烷化磁纳米颗粒固定化果胶酶改善烟草浸膏品质.pdfVIP

TabacariaSinica 中国烟草学报Acta 26 氨基硅烷化磁纳米颗粒固定化果胶酶改善烟草浸膏品质 颜克亮1，陈虹2，王文峰2，胡巍耀1，凌军1，陈微1，余洪波2 l云南中烟工业有限责任公司，技术中心，云南昆明红锦路367号650231； 2华中科技大学，生命科学与技术学院，湖北武汉洪山区珞瑜路1037号430074 摘要：为降低烟草浸膏中的不利成分，首次利用氨基硅烷化磁纳米颗粒固定化果胶酶制剂处理烟草浸膏，研究了酶处理条件对 浸膏中果胶和蛋白含量的影响，并对处理后的烟草浸膏在再造烟叶中的应用效果进行感官评价。结果显示：①固定化果胶酶蛋白 3．5、酶浓度4．44U／mL、反应时间 及酶活回收率分别为44．44％和40．86％；②固定化酶处理的最佳条件为：温度50℃、pH 24 将处理后的烟草浸膏用于再造烟叶制备，吸味明显改善。该方法可有效降低烟草浸膏中果胶含量，并除去残留酶蛋白，可改善烟 草浸膏品质。 关键词：烟草浸膏：氨基硅烷化磁纳米颗粒；固定化果胶酶；还原糖；果胶水解 引用本文：颜克亮，陈虹，王文峰，等．氨基硅烷化磁纳米颗粒固定化果胶酶改善烟草浸膏品质【J]．中国烟草学报，2016，22(2) 从废次烟叶和烟梗中提取出来的叶膏、梗膏等 烟草浸膏具有丰富烟香、体现烟草本香的作用，用于 基硅烷化磁纳米颗粒为载体固定果胶酶，利用固定化 再造烟叶的制造[1】。然而，浸膏中的果胶、蛋白等成 酶制剂处理叶膏和梗膏，旨在为改善烟草浸膏品质提 分，会使再造烟叶存在吸味品质差、杂气重等缺陷， 供一个新的技术思路。 影响了再造烟叶在卷烟产品中的应用[2】。酶处理法常 1材料与方法 用于改善浸膏品质、降低果胶等不利成分含量，李琳 等利用果胶酶、纤维素酶、淀粉酶和中性蛋白酶处 1．1材料和仪器 理废次烟末制备烟草浸膏，可有效提高再造烟叶品 1．1．1 材料 质【3]。酶本身是一种蛋白质，处理后的酶蛋白残留会 (3一氨丙基)三乙氧基硅烷(AR，阿拉丁试剂 对浸膏品质产生负面影响，且残余酶灭活不充分也会 影响再造烟叶质量，因而限制了酶处理法在生产中的 应用。近年来，具有稳定性高、易分离、无毒等特点 的磁纳米颗粒作为一种固定化酶的载体，受到了广泛 醇(AR，国药集团化学试剂有限公司)；果胶酶(BR， 的关注【4】。利用磁纳米载体固定酶的方法与包埋方式 上海瑞永生物科技有限公司，最适温度50℃，最适 的酶固定方法相比，其具有比表面积大，分散性好等 3．5)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(上海碧云天生 pH 特点，可以提高固定化酶的酶解效率【5]。本研究以磁 物技术有限公司)；烟草浸膏：叶膏、梗膏(红云红 纳米颗粒为载体固定果胶酶，可在外加磁场作用下实 河集团)。 现从反应体系中分离回收，因而有望解决酶处理法蛋 1．1．2仪器 白残留的难题【6】。目前利用磁纳米颗粒固定果胶酶的 X射线衍射仪(荷兰帕纳科公司)；电动搅拌器 研究还未见报道，而固定化酶技术在烟草领域的应用 (武汉科尔仪器设备有限公司)；数显恒温水浴锅(金 也鲜有报道。本研究以(3一氨丙基)三乙氧基硅烷坛市富华仪器有限公司)；钕铁硼磁铁；紫外一可见 基金项目 云南中烟科技项目(No．2013FL041 作者简介 颜克亮(198l一)，博士，工程师，主要从事烟草相关技术及产品研发工作，Emaih unclelia@163．tom 通讯作者 余洪波(1977一)，Emaih yuhongbo@hust．edu．cn 收稿日期 2015—07．21 颜克亮等 氨基硅烷化磁纳米