金银花组织培养及快速繁殖.doc

金银花组织培养及快速繁殖摘要：金银花作为一种清热解毒的良药，在我国乃至世界医药领域应用广泛。巨大的市场需求催生了对金银花的快速繁殖技术研究步伐，通过组织培养技术对金银花进行快速繁殖已经取得了一定的进展，在保护金银花的物种纯度以及繁育的速度上已经达到了一定的水平，文章在研究现有的关于金银花的组织培养的基础之上，总结了金银花组织培养的具体步骤，以及在快速繁殖过程中应该注意的问题。 关键词：金银花；繁殖；培养技术 中图分类号：S687 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2012）-04-0197-2 1 金银花的生长特性 植物金银花又名忍冬，为忍冬科多年生半常绿缠绕木质藤本植物。“金银花”一名出自《本草纲目》，由于忍冬花初开为白色，后转为黄色，因此得名金银花。 金银花的原产地在中国，在金银花的生长过程中适应能力较强，在我国的每个省份都可以生长。金银花喜阳、耐阴，耐寒性强，也耐干旱和水湿，对土壤要求不严，但以湿润、肥沃的深厚沙质壤上生长最佳，同时对土壤的酸碱度的适应性也比较强，在酸碱等环境下都能正常生长。 2 目前金银花快速繁殖的主要技术 2.1 扦插繁殖 扦插繁殖，就是将金银花的枝条同金银花植株进行分离后，种植于土壤，让其在土壤中生根发芽，扦插繁殖所选用的枝条的成熟程度不同，可以选择充分木质化的枝条进行繁殖，也可以选择未经过充分木质化的枝条进行繁殖。 2.2 压条繁殖 压条繁殖通天扦插繁殖的方法相似，区别就在于压条的枝条不与金银花的植株分离，在生根发芽的过程中，还可以从金银花的植株吸取养分，待其生根发芽后在与母体分离。 2.3 分株繁殖 分株繁殖的方法就是在金银花营养生长阶段，在水肥充足的情况下，促进其植株的生长，根部分蘖较多，或者是植株的枝蔓生长的较多，然后将这些枝蔓或者分蘖后的根芽进行分离，在种植于土壤当中的繁殖方法。这种繁殖方法不建议应用到采摘期的金银花的繁殖，防止影响金银花的收获数量。 2.4 组织培养 金银花的组织培养技术出现于上世纪七八十年代，就是通过母株的芽培养、茎培养、离体叶培养、细胞培养等途径，以更好的保持母种的优良性状，提高金银花的繁殖系数，打破原有的周年繁殖的代数，使金银花的繁殖实现工厂化、大批量。 3 金银花的组织培养技术 3.1 茎尖、茎段、芽的培养 在金银花植物体的培养时发现，采集不同时期的植物体进行培养，成活率以及从芽生长情况区别较大，经验表明正处于生长季节的嫩茎以及嫩的顶芽培养的成功率较高。春季采集的植株茎体培养的成活率高于夏季所采集的植株茎体，且顶芽的生长速率也高于带腋芽的茎段，不定芽的生长也比较快。 在进行培养时，首先需要对采集的植株体进行消毒处理，一般是采用75%的医用酒精，浸泡10-20秒，再用无菌水冲洗2-3次。还可以在消毒之前选择用紫外线灯进行20分钟的照射，进行预消毒处理。有经验表明由于金银花的茎部表面密被绒毛所以在消毒液中添加2-3滴司盘60或者吐温80可以增加消毒的效果。由于金银花属于木本植物，所以其培养周期中的各个时期都较长。且由于金银花叶片表面有毛，很难彻底的杀菌，致使愈伤组织成活率都较低。实验过程中死亡和褐化的数量较多，所以应控制好灭菌的时间和紫外杀毒的时间，在叶片的处理过程中也控制好升汞的浓度，以保持好叶片和芽的活性，增强诱导率和存活率。 在消毒完成以后，便进入诱导培养阶段，诱导培养就是选用MS或者是经过改良后的MS培养基，或者是选用B5培养基进行培养，根据不同的金银花品种选择与之相适应的培养基，并选择合适的浓度，可以提高丛生芽的诱导效果。目前在进行诱导培养的过程中较多的采用细胞分裂素和生长素的浓度比为10-12.5:1。 完成金银花的诱导培养以后便可进行金银花的增殖培养。增殖培养的培养基与诱导培养的培养基基本相同，也较多的采用MS培养基，在MS培养基的矿物质浓度在75%时，可以明显的提高蓝靛果增殖的效果，但是75%的矿物质以下，随着矿物质含量的减少增殖的效果逐渐降低，在降低至50%时，顶芽的破坏程度明显增加。通过调节增殖培养基中细胞分裂素和生长素的浓度配比来实现组培苗增殖。同时金银花的增殖培养过程中，还受到培养基的含糖量，培养基中琼脂含量的多少，培养基的PH值，培养基受光照时间的长短以及强弱、培养的温度以及自身生长周期的影响。 金银花的增殖培养完成之后，便开始了生根培养阶段。生根培养多采用1/2MS培养基，也有部分的生根培养采用的是1/4培养基。所采用的生长素为IBA、NAA、IAA。不同的诱导生根的生长素种类以及浓度有着较大的差别。同增殖培养一样，随着对培养基中的矿物质的含量的调节可以调节生根的速度，一般认为，培养基中有效矿物质含量的降低可以提高生根的速度，但是与生根的数量无关