评价不同溶解缓冲液以改善公猪精子蛋白质体分析之-中国畜牧学会.pdf

中國畜牧學會會誌，40(3) ：183～189, 2011 評估不同溶解緩衝液以改善公猪精子蛋白質 體分析之解析度 陳玉惠(1) 郭有海(2) 鍾孟婷(1) 邱玉芳(3) 黃三元(1)(3)(4) 完全解析細胞或組織內的蛋白質是研究蛋白質體的必要前提，為完全瞭 解豬精子之蛋白質組成，本研究比較了五種不同的蛋白質樣品溶解緩衝液。自 3 頭性成熟公豬採集精液供精子蛋白質分析，精子以5x108/mL 的濃度溶解於不 7 同組成的溶解緩衝液中， 取 1x10 個精子之總蛋白質進行二維聚丙醯胺膠體電 泳分析，再以colloidal Coomassie blue 染色，染色後之蛋白質圖譜供進一步評估 各溶解緩衝液之解析效果。分析結果顯示含有 9.8 M urea 、2% octyl-B-gluco-pyranoside 、100 mM dithiothreitol 及蛋白質分解酶抑制劑混合片(1 片/10 mL)之溶解緩衝液對豬精子蛋白質組成有最佳之解析度，本研究所確認之 蛋白質溶解緩衝液將可用於未來公豬精子蛋白質體之相關研究 。 (關鍵語：公豬、Colloidal Coomassie blue 、溶解緩衝液、蛋白質圖譜、精子、 二維電泳) (1)臺灣動物科技研究所生物科技組，35053 苗栗縣竹南郵政 23 號信箱。 (2)臺灣動物科技研究所應用動物組，35053 苗栗縣竹南郵政 23 號信箱。 (3)國立中興大學動物科學系，40254 台中市國光路 250 號。 (4)通訊作者，E-mail: syhuang@.tw 中國畜牧學會會誌，40(3) ：191～200, 2011 纖維分解菌之篩選與應用(1) 程梅萍(2) 廖仁寶(3) 蕭庭訓(2)(4) 本研究目標為篩選具有分泌纖維分解酵素特性之菌株，生產纖維分解酵 素，應用於提高禽畜糞纖維之分解，以增加沼氣產量。由乳牛瘤胃液分離出可 分解 Xylan 之 Bacillus subtilis XR1 與 Clostridium sp. XR61 ，前者為兼氣菌，後 者為厭氣菌；另由牛糞堆肥中分離出分解 xylan 之 Bacillus licheniformis XF12 與 Paenibacillus macerans XF62 ；分解微晶纖維素 Avicel 之 Psedomonas aeruginosa AF4 ；分解纖維素 CMC 之 Bacillus cereus CF3 與 Paenibacillus macerans CF51 。將各分離菌株接種於含纖維成分之培養基，在 40℃下培養一 週，培養日數 2-4 天時，胞外酵素活性最高。而培養 3 天，離心取胞外粗酵素 液在 pH 6-8 及 25-50℃下分析活性，大部分分離株皆在 pH 7 、40℃下活性較佳。 在牛糞廢水厭氣發酵槽中添加 Clostridium sp. XR61 菌株或其胞外酵素皆可提升 沼氣產量，但以添加菌株之效果較佳，其沼氣產量約為空白組 5 倍。