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啤酒工艺试验系统
第一部分 啤酒工艺综合实验
实验一 还原糖的测定 3 实验二 α-氨基氮的测定(茚三酮法) 4 实验三 双乙酰(紫外分光光度法) 5 实验四 总酸(电位滴定法) 6 实验五 酒精度 7 实验六 原麦汁浓度(蒸馏——密度法) 9 实验七 真正发酵度(实际发酵度) 10 实验八 协定法糖化和外加酶糖化法 11 第二部分 通风发酵综合实验
实验一 淀粉质原料的水分测定 12 实验二 原料中粗淀粉的测定 13 实验三 还原糖的测定 17 实验四 蛋白酶活力的测定方法 19 实验五 糖化酶的测定方法 22 实验六 玉米淀粉化糖化 面包酵母流加培养与分批培养试验
总还原糖(麦芽糖,g/ml麦汁)=f×n
或
总还原糖(麦芽糖,g/100g浸出物)=
式中: f——斐林溶液系数
n—— 稀释倍数
G—— 麦芽汁中浸出物含量(%)
D——麦芽汁20℃比重
注意事项:
(1) 本测定的操作条件必须严格控制,加热时间、滴定速度每次测定都必须一致,由沸腾至滴定完毕必须在3min内结束,否则应重做。
(2) 用硫代硫酸钠标准溶液标定斐林溶液,标准溶液的浓度应正好0.1000N,否则计算时应把用量换算成相当于0.1000N的用量。
实验二 α-氨基氮的测定(茚三酮法)
1、实验试剂
a显色剂
100克磷酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O)
60克磷酸二氢钾(KH2PO4)
5.00克水合茚三酮
3.00克果糖
用水溶液溶解后稀释至1升(此溶液在低温下用棕色瓶可保存2周,pH应为6.6-6.8。操作时可以按比例配成100ml)。
b稀释溶液:2克碘酸钾溶于600ml水中,再加入96%乙醇400ml.
c标准溶液:溶107.2mg甘氨酸于100ml水中,0℃贮藏。用时按要求稀释。该溶液含有200mgα-氨基氮/升。
2、实验操作
取糖化的麦芽汁1.00ml(或者是其他的合适量,使稀释后的浓度为1-3mgα-氨基氮/升),放入100ml的容量瓶中,稀释到刻度,摇匀。
标准甘氨酸溶液稀释液:取1.00ml标准溶液,在100ml的容量瓶中稀释到刻度。
取麦芽汁稀释溶液、水、标准的甘氨酸溶液(三个)稀释液各2.00ml,放入比色管中,(水用于空白对照),各比色管中分别加入1.00ml的显色剂,摇匀,在沸水中加热16min。(此时应该准备20℃的水浴)
20℃水浴中冷却20min。
加入5.00ml的碘酸钾稀释溶液,摇匀,在30min内于570nm处测定吸光度值。
3、计算
游离的α-氨基氮(毫克/升麦芽汁)=2×100×样品溶液吸光度值 / 标准溶液平均吸光度
实验三 双乙酰(紫外分光光度法)
1原理
双乙酰作为挥发性组份从啤酒样中蒸发出来,与邻苯二胺反应,生成2,3-二甲喹喔啉,在335nm波长下进行测定。由于其他联二酮类都具有相同的反应特性,再加上蒸馏过程中部分前驱体要转化成联二酮,因此上述测定结果为总联二酮含量(以双乙酰表示)。
2 仪器
带有加热套管的双乙酰蒸馏器 ;
具有锥形瓶(或平底蒸馏烧瓶)的蒸汽发生瓶:2000mL(或3000mL) ;
容量瓶:25 mL ;
紫外分光光度计:备有10mm石英比色皿或20mm玻璃比色皿。
3 试剂和溶液
4mol/L盐酸溶液:按GB/T 601配制;
l0g/L邻苯二胺溶液:称取邻苯二胺0.100g,溶于4mol/L盐酸溶液中,并定容至10mL,摇匀,放于暗处。此溶液须当天配制与使用;若配制出来的溶液呈红色,应重新更换新试剂;
有机硅消泡剂(或甘油聚醚) 。
4 分析步骤
4.1 蒸馏
将双乙酰蒸馏器安装好,加热蒸汽发生瓶,使水至沸。通汽预热后,置25mL容量瓶于冷凝器出口接受馏出液,外加冰浴冷却,加2~4滴消泡剂于100mL量筒中,再注入未经除气的预先冷至5℃左右的酒样100mL,迅速移入已预热的蒸馏器内,并用少量水冲洗带塞漏斗,盖塞。然后用水封口,进行蒸馏,直至馏出液接近25mL(蒸馏需在3~5min内完成)时取下容量瓶,达到室温用水定容,摇匀。
4.2 显色与测量:
分别吸取馏
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