纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘形成相关蛋白表达的影响.doc

　　纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘形成相关蛋白表达的影响 ：陈静 黄秋生, 窦毅 宗海洋，崔颜宏 庄琴 孙湘兰 龚爱华，张志坚 【摘要】 目的： 探讨纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘相关蛋白表达的影响。方法： 将体外培养的成人鼻粘膜嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架，用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照底物，培养14 天后用扫描电镜观察细胞的形态学变化并对细胞内髓鞘形成相关蛋白2,3环核苷3磷酸二酯酶（2′,3′ cyclic nucleotide 3′ phosphodiesterase，Pase）和髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein， MBP）进行免疫荧光染色定位和免疫印迹半定量测定，分析纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞Pase和MBP表达的影响。结果： 人嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架后，其形态为长条带状，细胞成束排列，方向一致。细胞内Pase和MBP表达水平明显高于对照组。结论： 纤维蛋白支架与人嗅鞘细胞具有很好的生物相容性并可促进细胞表达髓鞘相关蛋白Pase和MBP；将该组织工程支架用于移植 治疗 脊髓损伤，有利于再生神经纤维的髓鞘形成。 【关键词】 人嗅鞘细胞； 组织工程支架； 纤维蛋白（原）； 2,3环核苷3磷酸二酯酶； 髓鞘碱性蛋白 ［Abstract］ Objective: To investigate the effects of fibrin scaffold on the myelin associated proteins expression of the human olfactory ensheathing cells(hOECs) derived from olfactory mucosa. Methods： The hOECs ental group and the glass slides modified orph of the hOECs icroscopy. To investigate the effects of fibrin scaffold on the myelin associated proteins expression, the hOECs munofluorescence stained yelin basic protein(MBP). The relative contents of Pase and MBP ent. Some hOECs had migrated into the scaffolds. The results of immunofluorescence staining and BP of hOECs greote expressions of Pase and MBP in the hOECs seeded in the scaffold. The tissue engineering posed of hOECs and fibrin could be used for implantation to repair the injured spinal cord. ［Key an olfactory ensheathing cells(hOECs); tissue engineering scaffold; fibrin/fibrinogen; 2′,3′ cyclic nucleotide 3′ phosphodiesterase(Pase); myelin basic protein(MBP) 现有研究资料表明，嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells，OECs）移植修复脊髓损伤可促进实验动物的神经再生和改善后肢运动功能［1,2］。临床试验结果亦显示OECs移植治疗脊髓损伤具有良好的应用前景［3-6］。成人鼻黏膜OECs因取材方便，可用于自体移植，对其生物学特性及与支架材料的生物相容性进行研究具有更重要的实用价值［7］。我们在前期的研究中发现，大鼠鼻腔嗅黏膜OECs在纤维蛋白支架上生长良好［8］。但是，成人嗅黏膜OECs与纤维蛋白的生物相容性如何，尤其是纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞（human olfactory ensheathing cells, hOECs）髓鞘形成相关蛋白的表达有何影响，仍不清楚。本研究将体外培养的成人嗅黏膜OECs种植于纤维蛋白(fibrin, Fb)支架，用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照底物，观察纤维蛋白支架对hOECs的形态及其2,3环核苷3磷酸二酯酶（2′,3′ cyclic nucleotide 3′ phosphodiesterase，Pase）和髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein，MBP）表达水平的影响，以探讨hOECs/纤维蛋白支架移植入