胚胎工程实验技术(sy).ppt

浙江在线·科技新闻网2012年7月5日讯　　“胚胎干细胞移植治疗糖尿病动物实验成功。”必威体育精装版一期的国际期刊《糖尿病》，刊登了加拿大和美国科学家的一项研究成果。　　研究发现，患有糖尿病的实验鼠在接受了胚胎干细胞移植后，成功地恢复了胰岛素分泌功能。即使研究人员停止向它们注射胰岛素，并且被喂食了大量的糖，它们也依然能够保持健康的血糖水平。 四、胚胎干细胞技术 1、胚胎干细胞 （1）概念： 胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的内细胞团或胎儿的原始性腺细胞中分离得到的一类细胞。 （2）特点： 1）功能上： 是高度未分化的细胞，具有发育的全能性。能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。 2）形态上： 体积小、泡状、细胞核大。 （3）获取： 用酶消化或机械剥离内细胞团。 2、饲养层细胞培养体系的建立 （1）组成：胚胎成纤维细胞 （2）作用：促进干细胞生长，抑制干细胞分化（分化抑制因子） 3.胚胎干细胞培养 4.胚胎干细胞核移植： 指把胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 .鼠 5、胚胎干细胞的应用 .应用前景 5、胚胎干细胞的应用 （1）进行基因敲除，获得基因敲除动物。 （2）可定向分化为所需的特定细胞类型。 （3）是培育克隆动物的核供体。 1、胚胎干细胞来源于胚胎发育阶段的哪个时期，何种细胞？ 囊胚期内细胞团细胞。 2、怎样处理才能抑制胚胎干细胞分化？ 不断更换培养液或冷冻。 思考探究 1.下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是 A.受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植 B.受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态 C.超数排卵技术要使用一定的激素 D.试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行 2.下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确的是 A.供体母牛必须是同一物种的良种 B.受体母牛必须是同一物种的良种 C.供体公牛必须是同一物种的良种 D.受体母牛可以是同一物种的一般健康牛 练习: 3.供体的胚胎移植到受体后，游离的胚胎在发育过程中形成胎盘与受体相连，并通过胎盘与受体的血液进行物质交换。以下说法正确的是 A.受体是为供体胚胎提供发育的条件 B.受体与胚胎血型应相同，否则会发生免疫排斥反应 C.受体与胚胎血液混融在一起 D.胚胎心肺功能都能正常运行 4.利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的重要原因是 A.细胞分裂 B.细胞特化 C.细胞分化 D.细胞增殖 * * * 有性生殖 无性生殖 核移植技术、 胚胎移植 遵循 不遵循 体外受精 胚胎移植 试管动物 克隆动物 生殖方式 技术手段 遗传物质 遗传规律 比较试管动物和克隆动物 来自2个个体 主要来自核供体 二 胚胎移植技术 胚胎移植（embryo transfer,ET）指从经济价值较高、遗传性状优良的母畜体内获取经激素处理超数排卵受精发育的胚胎，移植到同期发情的代孕母的子宫内，经过妊娠、产仔的技术。 提供胚胎的个体称为------供体（donor） 接受胚胎的个体称为------受体（recipient） 本质 生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程； （一）胚胎移植前的准备 1、胚胎的采集 1）采用超数排卵技术，以增加可用卵的数量 2）利用体外授精技术培育胚胎。 3）采集方法：手术法和非手术法。 4）检出的胚胎必须在显微镜下观察，检查后完整的胚胎可移植到受体的子宫保存，整个过程迅速准确，并保持无菌操作。 2、供体、受体动物的准备 (1)选择 供体：遗传性能和生产性能优秀的个体； 受体：生产性能低，健康和正常繁殖能力的个体 处理：同期发情 具体做法： 注射相关激素。 供体的主要职能： 只产生具有优良遗传特性的胚胎； 受体的职能： 繁重而漫长的妊娠和育仔的任务； （2）配种或人工授精 精子来源： 同种优良的雄性动物。 （3）胚胎的收集 在配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来。 为什么在第7天进行冲卵？ 卵细胞在输卵管里完成受精和第1—3次卵裂大概需7天，然后下降到子宫内发育。 3、胚胎的保存 胚胎为什么要保存？ 胚胎保存的条件是什么？ 短期：0℃~5℃下的培养液中暂时保存； 长期保存：冷冻在液氮 -196℃中 液氮灌 （二）胚胎移植的实施 方法一：手术法 具体做法：引出受体子宫和卵巢，将胚胎注入子宫角，缝合创口。 方法二：非手术