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2章 抗原抗体反应1(免疫学)
抗体功能: 中和作用 调理作用 激活补体 ADCC 分泌型IgA局部抗感染作用 V区: 识别和特异性的结合抗原 摡念: 抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合。 体内反应:吞噬、溶菌、中和毒素等 体外反应:诊断、鉴别抗原或抗体 体外抗原抗体反应也称血清学反应 第一节 抗原抗体反应原理 亲合力(avidity) 是指整个抗体分子与抗原物质之间的结合强度。 第二节 抗原抗体反应的特点 弊:对临床检验产生干扰,McAb克服? 外斐反应:立克次体的脂多糖与变形杆菌某些菌株的O抗原有共同的抗原成分. 用这类变形杆菌代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应,这种交叉凝集反应叫外斐反应, 供立克次病的辅助诊断. 解离取决于: 自身因素:抗体对抗原的亲和力; 环境因素: 第三节 抗原抗体反应影响因素 第三节 抗原抗体反应影响因素 三、对照的设置 1.阳性对照: 2.阴性对照: 3.空白对照: 4.标准对照: 第四节 抗原抗体反应类型 表 表 凝集反应 非标记技术 补体参与反应 沉淀反应 免疫技术 荧光免疫技术 酶免疫技术 标记技术 放射免疫技术 化学发光免疫技术 金标记技术 思考题 抗原抗体的影响因素 抗原抗体反应基本类型 A型溶血性链菌胞壁成分与人心肌间质抗原成分的交叉反应 自身组织与微生物具有交叉抗原举例 微 生 物 抗 原 自 身 抗 原 链球菌M蛋白 心肌球蛋白 Yersinia菌氧化酶 HLA-B27 逆转录病毒P30 GAG U1 RNA EB病毒GP110 HLA-Dw4 EB病毒EBNA-1 类风湿关节炎滑液细胞 EB病毒BBLF1蛋白 HLA-DQw8 乙肝病毒多聚酶 髓鞘碱性蛋白 结核菌热休克蛋白(HSP) 人HSP 细胞磷脂 DNA 二、比例性(proportionality) * 等价带(equivalence zone) 抗原与抗体分子比例 合适的范围。 * 前带(prozone):当抗体过量时。 * 后带(postzone):当抗原过量时。 Ag和Ab比例适合,反应快,生成复合物量最大,可见。 如浓度比超过一定范围时,沉淀反应速度和沉淀量都会迅速降低,甚至不出现沉淀。 比例性示意图 抗体过量 比例合适 抗原的量 抗原过量 抗体沉淀的量 前带 等价带 后带 三、可逆性(reversibility) 概念:是指抗原与抗体结合成复合物后,在 一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性。 解离后抗原抗体仍保持原有特性。 一定条件:低pH、高浓度盐等。 常用于解离抗原抗体复合物的物质有: 3mol/L硫氰化钾、pH2.4 0.1mol/L甘氨酸、 6 mol/L尿素等。 抗体 混有Ag 非特异抗体 抗体 分离剂 可逆性示意图 抗体 一、反应物自身因素 *抗原:1.理化特性:颗粒/可溶性 2.Ag决定簇数量 3.Ag决定簇种类 *抗体:1.来源:R型(等价带较宽),H型则反 2.特异性与亲合力 3.浓度:浓度合适,比例适当 二、环境条件: *电解质:如0.85%NaCl,破坏水化层,促进凝集/沉淀 *酸碱度:pH6~8 *温度:15~40℃。特殊抗体例外。 *自凝集:如当pH接近Ag等电点,可出现非特异性凝集,造成假阳性。 1.沉淀反应 2.凝集反应 3.补体参与的反应 4.中和反应 5.免疫标记 抗原抗体反应的基本类型 表 反应类型 实验技术 检测方法
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