浅议检验室质控存在问题及其对策.docVIP

浅议检验室质控存在问题及其对策[摘要] 室内质量控制(IQC)是由实验室人员采用一系列方法，连续的评价本实验室工作的可靠程度，确定报告能否发出，是保证实验室工作质量的重要措施。目前检验系统检均采用ELISA法。ELISA有其自身的特点如灵敏度较高，同时影响因素也较多，这就更需加强质量控制。本文就实验过程中出现的一些问题及其对策报告如下。 [关键词] 质量控制 问题 对策 [中图分类号] R135.99[文献标识码] A[文章编号] 1005-0515（2011）-08-304-01 1 质控物要求 室内质控的开展要求有高质量的质控物，质控物的好坏直接影响监测，一般基层单位均选用卫生部临检中心提供的免疫质控血清，其具有良好的质量保证，但是在贮存运输和使用过程中受许多因素的影响。质控物的购买应避开7、8、9高温季节，以免邮寄过程中造成含量下降。质控物要求-20℃保存，而质控物含量较低，4℃存放也会使含量下降，一般HBsAg使用3d，抗-HCV使用1周即需更换。避免反复冻融，因反复冻融能使蛋白质变性抗原成份及空间构象发生改变。还可选用上海或其他血液中心提供质控品，作可比性试验以验证。 2 问题与对策 2.1 试剂 目前使用的国内试剂厂家很多，能通过批批检只是起码要求，其灵敏度和特异性都有差异。加之运输储存多种因素影响，到用户使用时质量已经发生了不同程度的变化。选购试剂时，省级以上的血液中心可以成立“试剂评价系统”，由质控科、检验科、共同参与组成并制定标准，质控科负责对新购试剂评价，检验科在大标本的筛选中评价现用试剂日间差、板间差、初复检阳性率比较及操作可行性；就目前可参考权威部门发布的试剂评价结果，还可到大血站、临检中心等单位了解一下哪种厂家哪一批次的质量可靠，然后向厂家查询丙肝的包被片段，初检试剂选片段多而全、灵敏度高的，复检选特异性好的试剂。 2.2 加样与稀释 由于免疫试验加样仅10μl，多加或少加1μl就可造成10%的误差，因此移液器的准确性需经常校验，最好使用进口移液器，同时移液器和移液头间连接应严密，建议取样时移液头应刚进液面，以免粘带血清。稀释液勿用滴瓶滴加，以免造成稀释倍数的变化，对灰带区造成误判，使用移液器加样较稳定。稀释方式:①在板中加入100μl稀释液再加10μl标本，待样品全部加完混匀；②预先进行1∶11稀释然后加到每孔中；③在板中加入100μl稀释液再加10μl标本，同时吹吸3次混匀。根据报道第1种方式易致非特异性IgG吸附到包被抗原或固相载体上，第2种方式在大量标本检测时亦不适用，以第3种方式为好。 2.3 温育 37℃温育常采用3种方式即恒温培养箱、水浴箱和电热块，根据报道以恒温培养箱为佳，由于培养箱中板的周围都是37℃，而水浴箱的温度指标的是水的温度，虽然酶标板漂浮在37℃水浴中板底37℃，但空气温度在开盖时会下降(尤其在冬季)，温度上升比培养箱慢，达到37℃所需时间长，导致吸光度下降。 2.4 洗板 一般基层单位洗板机不提倡使用96孔头而选用8或12孔头，应随时注意孔头是否堵塞，同时要求洗板后残液＜2μl即人工扣板垫纸不湿，浸泡时间＞45s。洗液预先用合格的蒸馏水配制并充分溶解，保持PH正常。定期清洗容器防止长菌长霉，这些都是防止花板、本底增高的重要措施。 2.5 显色 严格按说明书控制显色时间、温度以免人为造成吸光度升降，而影响灰区结果，加终止液后及时比色。TMB被认为是ELISA反应中最佳色原底物，但终止15min后高浓度者易产生灰褐色絮状沉淀并伴黄色渐退吸光度下降，建议终止15min内及时比色。 2.6 酶标仪性能评价与鉴定 卫生部明确规定酶标试剂不得用目测法判结果，仪器和设备是搞好质控和日常工作的前提和保证。有关资料介绍了一套以490nm、甲基橙溶液为例的酶标仪的评价方法，内容包括滤光片波长、零点飘移、线性、精密度、通道差与孔间差等，具有较高的实用价值。经常维护其光学部分防止滤光片霉变、定期检测校正，使其保持良好的工作性能。 3 结论 室内质控的目的在于能控制实验室每天的检测结果是否可靠，能否报告，是实验室管理的最基本措施。临界值血清做室内质控血清可防止弱阳性标本漏检，每次实验时随献血者标本加测，每板一孔如未失控证明实验可靠，原始记录保存可作因输血所致医疗纠纷的一个关键证据。实验过程中失控现象时有发生且以超过下限为多见，致临界值结果阴性，此点应引起特点重视，必须将失控板重做并找出原因，以确保报告准确性。由于开展了室内质控，工作人员责任心加强了，操作更规范，提高了实验检测的准确性，有效保证了血液的质量。 参考文献 [1] 成军,孙关忠,李早荣,等.酶标仪性能评价与鉴定的基本方法及应用[M].北京医科大中国协和医科大联