生脉解毒通络胶囊对糖尿病大鼠心肌组织ECM积聚影响.docVIP

生脉解毒通络胶囊对糖尿病大鼠心肌组织ECM积聚影响摘要：目的：研究糖尿病大鼠心肌组织ECM积聚及中药生脉解毒通络胶囊的调节作用。方法：46只Wistar大鼠用链脲佐茵素诱发糖尿病后，随机分为DM组、苯那普利治疗组和生脉解毒通络胶囊治疗组，以正常10只大鼠作为对照。连续处理12周后，应用免疫组化方法检测心肌组织的基质金属蛋白酶(MMP－1)及其抑制物(TIMP-1)和I、Ⅲ型胶原的蛋白表达水平。结果：DM大鼠-11MP-1及I、Ⅲ型胶原蛋白表达增加，MMP-l表达减少，生脉解毒通络胶囊组心肌组织TIMP―l及I、Ⅲ型胶原蛋白表达明显低于DM组(P0.05)。见表1。 2.2　血糖和血脂 与N组相比，D组大鼠Tcho、TG、血糖均明显上升(PO.05或O.01)，DS组和DB组的上述指标均较D组显著下降(P0.05，P0.01)。见表2。 2.3　心肌形态观察 (1)光镜观察：正常对照组大鼠心肌肌膜完整，核圆形或椭圆形居中，心肌间质内可见少量PAS阳性物质沉着。DM模型组大鼠心肌间质成纤维细胞、PAS阳性物质明显增多。实验组与阳性对照组心肌间质也有相似病理改变，但较DM模型组明显减轻，间质细胞增生及PAS阳性物质沉着明显减少。实验组与阳性对照组相比病变略轻。 大鼠心肌细胞中仅在血管周围可见少许红染的胶原纤维，心肌闻质胶原很少。DM模型组大鼠心肌细胞间及血管周围可见胶原含量明显增多，染色呈深红色为主。阳性对照组大鼠肌间质胶原含量减少，染色减轻。图像分析测定结果显示，与正常对照组比较，DM模型组Coll、ColⅢ含量及ColI／ColⅢ比值均增高(P0.01，P0.05)；阳性对照组Coll含量及Coil／ColⅢ比值明显高于正常对照组(P0.01)，与DM模型组比较，阳性对照组ColI含量及ColVColⅢ比值降低，差异有显著意义(P0.05)。见表3。 2.4　免疫组化染色半定量分析 见表4。实验第12周末，DM模型组心肌组织TIMP-l，蛋白表达免疫染色呈棕黄色，从强度到面积都较正常对照组明显增加，半定量分析结果表明，较正常对照组高2.7倍，具有显著性统计学意义(P0.01)；与正常对照组和DM模型组比较，阳性对照组和实验组TIMP-1蛋白表达从染色强度到面积均明显减轻(附图略，下同)，半定量分析结果表明，其TIMP-1蛋白表达介于两者之间，差异均具有明显统计学意义(P0.01)；实验组TIMP-1蛋白表达较阳性对照组降低12％，差异有显著性统计学意义(P0.01)、。结果显示苯那普利及生脉解毒通络胶囊具有明显抑制心肌组织中TIMP-1蛋白表达作用，而且生脉解毒通络胶囊抑制心肌组织中TIMP-l蛋白表达的作用强于苯那普利。 3　讨论 生脉解毒通络胶囊是中药复方，由人参、麦冬、黄芪、生地、黄连、丹参、红花等10种中草药配制而成，具有益气养 阴、解毒通络之功效。本研究通过以苯那普利治疗组为阳性对照组，初步探讨中药生脉解毒通络胶囊对糖尿病心肌的保护作用及其作用机理，以求通过本研究为临床更好地防治DCM提供新的治疗手段。 3.1　生脉解毒通络胶囊对糖尿病大鼠心肌组织形态学变化的影响 DCM是一种特异性心肌病，是DM的主要慢性并发症，其特征性的形态学改变是心肌ECM积聚和心肌间质重构。本研究结果表明，经生脉解毒通络胶囊及苯那普利治疗后的中药实验组和阳性对照组，病理改变较DM模型组明显改善(P0.01、P0.05)，表明生脉解毒通络胶囊与苯那普利对DM大鼠的心脏结构具有一定的保护作用，且与苯那普利相比，生脉解毒通络胶囊能明显地降低血糖、血脂水平，改善代谢紊乱，表明生脉解毒通络胶囊对糖尿病大鼠心肌的保护作用可能更为优越。 3.2　生脉解毒通络胶囊对糖尿病大鼠心肌组织ECM积聚的影响 国内外大量研究结果均表明，间质胶原和FN等ECM成分合成增加和／或降解下降导致ECM积聚，是器官和／或组织间质纤维化的特征性改变。ECM的代谢异常在当前DCM研究中逐渐得到重视。研究结果显示，DM模型组大鼠实验12周，心肌间质ColI、ColⅢ显著增多，可达正常时的3倍以上，其病理特征表现为免疫组化及天狼星红染色阳性区域染色明显加深，且范围明显扩大，表明心肌正常ECM成分的过量聚积与DM性心肌间质纤维化的发生有关。本研究发现，生脉解毒通络胶囊和苯那普利可显著降低心肌间质纤维化时Col I、ColⅢ蛋白的表达，从而减少ECM积聚，延缓心肌间质纤维化的发展进程，表明生脉解毒通络胶囊具有良好的防治DCM的作用。 在生理情况下，心肌ECM的合成与降解处于平衡状态，这对维持心肌正常结构和功能起重要作用；在病理条件下，心肌ECM合成增加和／或降解减少，打破原有的平衡，引起ECM