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白虎羚退热散抑菌作用探究(1．南阳市中心医院药剂科，河南南阳473000；2．河南中医学院，河南郑州450008) 摘要：目的：观察白虎羚退热散的抑菌作用。方法：通过平皿法和试管内药液稀释法观察白虎羚退热散的抑菌作用。结果：白虎羚退热散对肺炎双球菌及金黄色葡萄球菌最敏感，对乙型链球菌敏感，对大肠杆菌不敏感。结论：白虎羚退热散对其敏感的细菌有明显的抑菌作用。 关键词：白虎羚退热散；抑菌作用 中图分类号：R285.5　文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)05-1016-02 白虎羚退热散是由仲景白虎汤去梗米加羚羊角粉制成，临床用于治疗阳明经热盛或温热邪在气分等症取得了较好疗效，为验证其药效，本实验研究了其抑菌作用。 1材料与方法 1.1药物 白虎羚退热散，由河南中医学院中心实验室提供，批号000405；白石清热冲剂，沈阳飞龙制药有限公司生产，批号000205。 1.2培养基 肉汤培养基，余姚微生物培养基厂生产，营养琼脂培养基，中国药品生物制品检定所生产，血琼脂培养基(供乙型链球菌、肺炎双球菌用)。 1.3菌种 肺炎双球菌(31001)、乙型链球菌(32204)、金黄色葡萄球菌(25923)、大肠杆菌(25922)，均由河南省防疫站提供(冷冻标准菌株)。 2实验方法与结果 2.1 药物抑菌实验平皿法 2.1.1药物制备　称取白虎退热散15g，加蒸馏水至30mL，溶解混悬后作倍比稀释，共4个稀释度，使浓度为500、250、125、62.5mg/mL的供试液。稀释后105℃灭菌30min，备用，白石清热冲剂药液的制备同白虎羚退热散。 2.1.2培养基制备　肉汤培养基：称取肉汤培养基5g，加蒸馏水稀释至500mL，116℃灭菌20min。 2.1.3菌液制备　将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌接种于营养琼脂平皿，37℃培养24h；乙型链球菌、肺炎双球菌接种于血琼脂平皿，37℃培养24h。挑选2个典型单个菌落接种于2mL肉汤培养基中，37℃培养18h(乙型链球菌、肺炎双球菌加入无菌羊血0.15mL)。上述菌悬液用肉汤培养基稀释至10-5。 2.1.4接种 分别将4个稀释度的供试液及对照液2mL与18mL营养琼脂培养基加入编号为1～4的无菌平皿中，乙型链球菌及肺炎双球菌培养基中加入无菌羊血1.0mL，摇匀并冷却，培养基内药液浓度分别为1:20、1:40、1:80、1:160。没皿中加入10-3试验菌液0.05mL，用L棒涂匀，37℃培养24h，计算。每种药物每个稀释度做2个培养基。同上法再接种3个不含药物的培养基做阴性对照。 2.1.5使用菌液细菌计数　取实验用10-5菌悬液(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎双球菌、乙型链球菌)0.05mL均匀琼脂平皿上，每种作2个平皿，置37℃培养24h，计算菌落数。 2.1.6观察方法　阳性对照平皿中细菌生长良好，阴性对照平皿中无细菌生长，含药平皿中菌落形态与阳性对照平皿相同，不同者为杂菌污染，以培养基中无细菌生长者为该受试中药的最低抑菌浓度(MIC)。各平皿均无杂菌污染，阳性对照平皿中各种菌均生长。 2.2药物抑菌实验试管内药液稀释法 2.2.1材料与制备　同平皿法。 2.2.2药物抑菌实验 白石清热冲剂药物肉汤培养基的制备：秤取白石清热冲剂20g，加肉汤培养基至40mL。另取13mm×100mm试管9支(编号1～9)，于第1管中加入上述白石清热冲剂药物培养基4.0mL，其余每管中各加入肉汤培养基2.0mL加入第3支管中，以此类推，直到第7管取出2.0mL弃去。使管中药物为500、250、……7.6mg/mL。第8管不加药物作为对照，以观察培养基是否适合于细菌生常。第9管中加白石清热冲剂药物2.0mL，混合后取出2.0mL，不加菌液，以观察受试药物是否有污染。试管加棉塞，105℃灭菌30min，备用。 白虎羚退热散药物肉汤培养基的制备同白石清热冲剂。将肉汤培养6～8h的实验菌液，用无菌肉汤稀释成10-3，取0.1mL分别加入上述1～8管中，混合后一起放入37℃培养箱中培养24h，每种菌平行作2支试管，若肉汤混浊，表示细菌生长，若肉汤完全清亮，表示无菌生长，按上述试管培养法分别取0.5mL划线接种于营养琼脂平皿中(乙型链球菌、肺炎双球菌的培养基内加1.0mL无菌羊血)。37℃培养18h观察结果。菌落生长数≤10个的药物浓度是受试中药的最低杀菌浓度(MBC)。各管均无杂菌污染，阳性对照平皿中各种菌均生长。 3讨论 白虎羚退热散是由仲景白虎汤方加减而成，主要成分为石膏、知母、羚羊角粉、甘草等，方中石膏性大寒，善能清热，以制阳明(气分)内盛之热，并能止渴