白血病及MDS患者PMNC中GATA-1及GATA-2基因表达.docVIP

白血病及MDS患者PMNC中GATA-1及GATA-2基因表达[摘要]目的探讨GATA-1和GATA-2基因在白血病和MDS中的表达及其意义。方法 利用RT-PCR技术检测22例白血病和MDS患者PMNC中GATA-1和GATA-2基因的表达。结果 白血病患者PMNC中GATA-1,GATA-2基因高度表达,表达率分别为9/18,10/18;MDS患者PMNC中GATA-1基因高度表达,表达率为1/4,GATA-2基因不表达。结论 推测转录因子GATA-1,GATA-2对白血病和MDS细胞表型的形成起不同的调节作用。 [关键词]基因的表达; 白血病; MDS [中图分类号] R733.7[文献标识码]A [文章编号] 1005-0515(2010)-7-031-01 在正常造血细胞分化发育过程中,转录因子对特异细胞表型的形成起重要的调节作用。转录因子GATA家系属锌指结构类转录因子家族,含有两个能识别并结合调节顺序[T/A(GATA)A/G]的同源性锌指结构[1]。GATA-1是红系细胞特异性转录因子, 表达在红系、巨核系、肥大细胞[2].GATA-2对髓系细胞分化起广泛地调节作用,在早期干/祖红细胞增殖中也起关键作用[3]。目前已有少量关于GATA-1,GATA-2基因在急非淋白血病中表达的报道。尚未见在急淋白血病和骨髓增生异常综合症中表达的报道。本文利用反转录-聚合酶链反应方法检测了22例白血病和MDS中GATA-1,GATA-2基因的表达情况。 1 材料和方法 1.1 标本资料 本组病例共22例,男16例,女6例,年龄14-70岁。白血病18例,其中ANLL 5 例,ALL 10 例,CML 3 例;MDS 4 例,其中RA 1 例,RAEB 1 例,RAEB-T 2例。所有病例符合FAB协作组提出修订的白血病,MDS诊断标准。正常对照组15例为合格献血员。 1.2 方法 1.2.1外周血单个核细胞(PMNC)中RNA提取及转录合成cDNA按常规的实验方法[4]。 1.2.2聚合酶链反应(PCR):2对引物为:GATA-1 f/b;GATA-1f:5’-CAG TAA ACG AGC AGG TAC TC ( 808- 827bp ),GATA-1b:5’-CAT CAA GCC ACC AGC TGG TC (1063-827bp);GATA-2 f/b;GATA-2f:5’-GAA GAG CCG GCA CCT GTT GT (1023-1222bp);GATA-2b:5’-GAA TGA CTT CTC CTG CAT GC (1453-1434 bp)。PCR方法按Saiki等报道[4]。 2 结果 2.1 GATA-1,GATA-2基因在白血病和MDS患者及正常人PMNC中表达情况见表1 2.2 GATA-1,GATA-2基因在白血病和MDS患者及正常人PMNC中表达联合情况见表2 表1 GATA-1,GATA-2基因在白血病 和MDS患者及正常人PMNC中表达情况 表2 GATA-1,GATA-2基因在白血病 和MDS患者及正常人PMNC中表达联合情况 图表明GATA-2的检测:以GATA-2 f/b一对引物应用PCR方法所扩增的产物,MW为分子量标志,1号为K562细胞株阳性对照,2-5号为GATA-2+病人标本,产物为251bp大小片段,6号为Molt4细胞株阴性对照,7号空白对照。 经2对特异性引物GATA-1 f/b,GATA-2 f/b所扩增的产物为特异性PCR产物,长度分别为256 bp,251 bp。15例急性白血病患者PMNC中GATA-1基因表达率为8/15,GATA-2基因表达率为9/15。GATA-1 、GATA-2联合表达率为6/15。 3 讨论 转录因子GATA家系是近几年才被发现的,共有6个成员。GATA-1作为红系细胞特异性转录因子对红系细胞发育起正性调节作用,GATA-2主要是维持和促进早期造血祖细胞的分化。ShimamotoT等报道了髓性白血病患者GATA-1和GATA-2基因的表达情况及其意义[5]。本文的试验结果表明,在急性白血病患者PMNC中GATA-1和GATA-2基因均有较高的表达,阳性率分别为8/15,9/15,远远高于正常人(P?0.01)。GATA-1基因表达于3/5例ANLL,GATA-2基因表达于4/5例ANLL,GATA-1 、GATA-2联合表达3/5例ANLL。LabbageT认为在髓性细胞不同的分化发育阶段,GATA-1,GATA-2基因表达不一致,起不同的调节作用[6]。GATA-1,GATA-2异常表达可能代表造血细胞的肿瘤特性,